Aplicación del sistema de dos fases acuosas a la purificación de peroxidasa de Armoracia rusticana expresada en larvas de Rachiplusia nu

A. TARGOVNIK; MARIELA FOGAR; CASCONE, O,; MIRANDA MARÍA VICTORIA

Congreso; REDBIO ARGENTINA 2013; 2013

La utilización de larvas de insectos para la producción de proteínas recombinantes es una alternativa biotecnológica interesante por su bajo costo. Para que estos procesos sean escalables, además debenestar acompañados de un esquema efectivo y económico de Downstream processing. El objetivo de este trabajo fue estudiar la extracción de peroxidasa de Armoracia rusticana recombinante mediante la aplicación de sistemas de dos fases acuosas a partir de larvas de Spodoptera frugiperda A partir del estudio del comportamiento de partición de la peroxidasa y las proteínas contaminantes en sistemas de dos fases PEG/fosfatos a distintos pHs y fuerza iónica, se seleccionó un proceso en dos etapas. La extracción directa de la peroxidasa se logró en la fase superior de un sistema de PEG 1500, - fosfatos, pH 5.0, con un rendimiento de 81,1 % y un factor de purificación de 22,7; En un segundo paso, la fase inferior del 1° sistema se cambió por sulfato de magnesio y se recuperó en la fase superior el 79,6% de la peroxidasa con un factor de purificación de 114,2. Se obtuvo un producto clarificado libre de partículas virales.