Expresión y purificación del Dominio III de la proteína de envoltura del virus del dengue de los cuatro serotipos y consenso, fusionados a hidrofobina en larvas de insecto

CEREZO, JULIETA; ALEXANDRA TARGOVNIK; LOPEZ; MARIA EMILIA SMITH; MARIA V MIRANDA; RODRIGUEZ TALOU

Congreso; Jorfybi 2017; 2017

El dengue es una enfermedad viral transmitida por mosquitos del género Aedes. El virus del dengue pertenece a la familia Flaviviridae y presenta cuatroserotipos antigénicamente diferentes (DEN-1, DEN-2, DEN-3 y DEN-4). Es un virus de RNA simple cadena y su genoma codifica para una poliproteína que trassu clivado da origen a tres proteínas estructurales cápside (C), membrana (M) y envoltura (E); y a siete proteínas no estructurales. La proteína E posee tresdominios, el dominio III (DomIII) contiene múltiples epitopes neutralizantes que son serotipo-específicos, y carece de otros epitopes que desencadenananticuerpos no neutralizantes de reactividad cruzada. Recientemente ha sido descripta una secuencia consenso del DomIII, basándose en el DomIII de laproteína E de distintas variedades de cada serotipo de todo el mundo, la cual demostró capacidad de generar una respuesta inmune contra todos losserotipos, por lo que es candidata a ser un antígeno vacunal contra el virus del dengue.Las hidrofobinas son proteínas anfifílicas de entre 7,5 ? 10 kDa, producidas por hongos filamentosos. Se ha observado que las proteínas fusionadas a ellascambian su grado de hidrofobicidad y pueden ser separadas fácilmente en sistemas de dos fases acuosas, principalmente en aquellos basados en surfactantesno-iónicos.El objetivo de este trabajo fue expresar y purificar los diferentes DomIII de los cuatro serotipos y el consenso fusionados a hidrofobina en larvas de insectoRachiplusia nu, con el fin último de desarrollar un kit diagnóstico