Expresión, localización y caracterización de una c7- esterol desaturasa en células de insecto sf9 para la producción de provitamina d3

POKLÉPOVICH; NICOLÀS URTASUN; MIRANDA MARÍA VICTORIA; NUSBLAT; CLARA NUDEL,

Congreso; REDBIO ARGENTINA 2013; 2013

Actualmente, la producción de provitamina D3 se hace través de procesos de síntesis química, que involucran numerosos pasos y compuestos peligrosos para el medioambiente. Proponer un sistema biológico para sintetizar provitamina D3 a partir de colesterol, implicaría una mejora en la producción sin dañar el medioambiente. Recientemente se identificó, en Tetrahymena thermophila (T. thermophila), la enzima responsable de la conversión de colesterol en provitamina D3 en dicho organismo, la C7 esterol desaturasa (DES7). El producto final de la biotransformación en T. thermophila no es la provitamina D3, sino que incluye, además, un doble enlace la posición 22. Para caracterizar a DES7, se expresó en células de insecto por 2 razones. En primer lugar la enzima DES7 es una oxigenasa Rieske tipo 1A, de alta similitud con una presente en los insectos con lo cual es esperable que la enzima heterologa se encuentre en un entorno favorable para su funcionamiento. En segundo lugar es posible sobreexpresar esta enzima gracias a la tecnología de baculovirus en células de insecto. En el presente trabajo se analiza la expresión en este sistema heterólogo, la localización microsomal y la actividad enzimática