LARVAS DE RACHIPLUSIA NU COMO BIOFÁBRICAS PARA LA EXPRESIÓN DE INTERFERÓN FELINO RECOMBINANTE

ALEXANDRA TARGOVNIK; VILLAVERDE MARCELA; MARIANA BERNADETT ARREGUI; GLIKIN; FINOCCHIARO; FOGAR; CASCONE; MIRANDA MARÍA VICTORIA

Congreso; REDBIO ARGENTINA 2013; 2013

El interferón felino (FeIFN) es una citoquina que se aplica en la industria veterinaria para el tratamiento y prevención de enfermedades virales de origen felino y canino y que no se comercializa en nuestro país. El objetivo de este trabajo fue producir FeIFN recombinante (rFeIFN) en el sistema baculovirus-larvas de Rachiplusia un.Se construyó un baculovirus recombinante donde el gen de FeIFN fue clonado bajo el promotor de poliedrina y el péptido de secreción de origen viral GP67. Por otra parte, se modificó el punto isoeléctrico (pI) del rFeIFN mediante el agregado de una etiqueta de 8 argininas en su extremo carboxilo. El nivel de expresión obtenido a partir de larvas de R. nu infectadas fue de 1,85x1010±0,16x1010 UI/kg de larva. El pI del rFeIFN varió de 6,5 a 9,15 y este cambio no afectó su actividad biológica. Finalmente, el rFeINF fue purificado por cromatografía de intercambio iónico a pH 7,0, seguido de una cromatografía de interacción hidrofóbica. Se obtuvo una proteína libre de partículas virales con un rendimiento del 80% y un factor de purificación de 59. Los resultados obtenidos alientan el desarrollo de una plataforma biotecnológica para la producción de interferones de uso veterinario basada en larvas de R. nu.