IMPACTO DE LAS TRAMPAS EXTRACELULARES DE NEUTRÓFILOS (NET) SOBRE LA FUNCIONALIDAD DE LAS CÉLULAS DENDRÍTICAS MIELOIDES HUMANAS

SABBIONE F; GABELLONI ML; IULA L; GORI S; GEFFNER JR; JANCIC C; TREVANI AS

Congreso; LX Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2012

Sociedad Argentina de Inmunología

Los cristales de urato monosódico (MSU) son señales de daño endógeno capaces de desencadenar respuestas inflamatorias. En pacientes con “Gota”, los MSU se depositan en articulaciones induciendo una respuesta inflamatoria sinovial en la que predominan los neutrófilos. Previamente demostramos que los MSU estimulan a los neutrófilos (PMN) a liberar trampas extracelulares (NET) conformadas por cromatina y proteínas granulares.  El objetivo del presente trabajo consistió en determinar si estas NET activan o modulan la activación inducida por LPS de células dendríticas mieloides humanas diferenciadas de monocitos de sangre periférica (CD). Para ello, 106 PMN fueron estimulados con 300mg/ml de MSU o vehículo por 4hs, luego fueron sonicados suavemente por 1 minuto a fin de separar las NET de los restos celulares, centrifugados y los sobrenadantes fueron recuperados, corroborada la presencia o ausencia de NET, e incubados con 2 x 105 CD en presencia o ausencia de 200 ng/ml de LPS durante 24 hs a 37°C. Luego, en los sobrenadantes de estos cultivos se determinó la concentración de citoquinas y sobre las CD la expresión de marcadores de maduración. Las NET no indujeron per sé la maduración de las CD evaluada en función de la expresión de CD86, HLA-DR y MHC clase I, ni indujeron la secreción de TNFa, IL-6, IL-8 e IL-10 (n=5). Las NET tampoco modularon la secreción de IL-6, IL-8 e IL-10 por CD maduradas por acción del LPS (n=5). Sin embargo, las NET inhibieron ~40% la secreción de TNFa por dichas células (n=5, exp. realizados por triplicado; p<0,01). La inhibición de la secreción de TNFa se correlacionó positivamente (r= 0,85) con la concentración de ADN detectada en las muestras de NET y no fue consecuencia de una reducción en la viabilidad de las CD por acción de las NET. La capacidad de las NET de inhibir la secreción de TNFa  por las CD podría modular la generación de células T regulatorias y TH17, un efecto que está siendo analizado en nuestro laboratorio.