Los cristales de urato monosódico estimulan la formación de trampas extracelulares de neutrófilos (NETs)

SABBIONE F; GABELLONI ML; JANCIC C; TREVANI AS

Tucumán

Congreso; LIX Reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2011

Los cristales de urato monosódico (MSU) son estímulos capaces de inducir inflamación en ausencia de infección (estímulos inflamatorios estériles). En algunos individuos con hiperuricemia los MSU se depositan en articulaciones y conducen al desarrollo de la artropatía conocida como gota, caracterizada por inflamación sinovial. Los neutrófilos se acumulan en dichas articulaciones, constituyendo el tipo celular predominante. Estudios previos demostraron que distintos estímulos microbianos o el PMA estimulan a los neutrófilos a liberar estructuras extracelulares constituidas por cromatina y proteínas granulares llamadas Trampas Extracelulares (NETs). El objetivo de este estudio fue determinar si los MSU son capaces de inducir la formación de NETs. Mediante inmunocitoquímica y microscopía láser confocal comprobamos que la estimulación de neutrófilos con MSU (300 ug/ml) condujo luego de 4 hs de incubación a la liberación de un material filamentoso similar al inducido por PMA, que se coloreó intensamente con ToPro-3 (colorante de ADN doble cadena), y que colocalizó con nucleosomas y elastasa, características distintivas de las NETs (n=3). La identidad de las NETs fue confirmada por la ausencia del material filamentoso, al estimular a los neutrófilos con MSU en presencia de nucleasa micrococal (n=3). El incremento en la actividad enzimática de elastasa en los sobrenadantes de cultivo de neutrófilos estimulados con MSU respecto de los estimulados con vehículo, corroboró la presencia de la enzima en el material liberado de los neutrófilos (% increm.: 113; n=4; p<0,05). La preincubación de neutrófilos con LPS incrementó la liberación de NETs inducida por MSU (n=3) y la actividad elastasa en el sobrenadante (% increm. respecto al basal: 159; n=4). En conjunto nuestros estudios sugieren que los MSU estimulan a los neutrófilos a liberar NETs, un efecto que puede ser potenciado por acción del LPS. Las NETs podrán contribuir a la intensa respuesta inflamatoria observada en la gota.