Mecanismos moleculares involucrados en la liberación de IL-1beta por neutrófilos humanos.

GABELLONI ML; FUXMAN BASS JI; GEFFNER JR; SALAMONE G; CATALANO M; TREVANI AS

Mar del Plata

Congreso; LVI Reunión anual de la Sociedad Argentina de Inmunología; 2009

Sociedad Argentina de Inmunología

La IL-1beta es liberada por el procesamiento proteolítico de su precursor, la pro-IL-1beta. En distintos tipos celulares, la estimulación de receptores citosólicos de tipo NOD por productos microbianos o por señales de daño endógeno, conduce a la formación de un “inflamasoma”, que recluta y activa a la caspasa-1, la enzima responsable del procesamiento de la pro-IL-1beta. También, la pro-IL-1beta podría ser procesada por mecanismos independientes de caspasa-1, aún no caracterizados. En este trabajo evaluamos la capacidad de los neutrófilos humanos de producir IL-1beta y los mecanismos moleculares involucrados. Los neutrófilos pre-tratados 3 hs con LPS liberaron IL-1beta en respuesta a ATP, PMA, sobrenadante de cultivo del patógeno P. aeruginosa (SCPa) y frente al co-cultivo con la bacteria entera (pg/ml IL-1beta detectados por ELISA: 15±6; 85±25; 521±85; 361±43; 231±49; 218±55; para medio, LPS -200 ng/ml-, LPS+PMA 20 ng/ml; LPS+ATP 2mM; LPS+5% SCPa o 107 bacterias/ml, respectivamente; n=6, p<0,05). La liberación de IL-1beta inducida por todos los agonistas excepto el PMA, fue significativamente reducida por el inhibidor II de caspasa-1 (% inh. 19±4; 59±13; 76±6; para PMA, ATP y SCPa, respectivamente; n= 3, p<0,05). El pre-tratamiento de neutrófilos con DPI (inhibidor de NADPH oxidasa), inhibió marcadamente la producción de IL-1beta inducida por PMA y SCPa; mientras el pre-tratamiento con catalasa, que degrada el H2O2 producido por activación de la NADPH oxidasa, incrementó su liberación inducida por ATP, PMA y SCPa. En conjunto, nuestros resultados sugieren que los neutrófilos liberan IL-1beta por un mecanismo que involucra la actividad de la caspasa-1, aún cuando no descartan que un mecanismo independiente de caspasa-1 pueda también ser operativo. Al menos en respuesta a PMA y SCPa, la liberación de  IL-1beta parece requerir de la producción de intermediarios reactivos del oxígeno, los cuales a su vez también podrían ejercer un mecanismo regulatorio negativo de la liberación de IL-1beta.