Efecto de la fotodimamia en tubulina sobre su estructura primaria: alteración del dominio de union a GTP y taxol.

CAROLINA CASTILLO; SUSANA CRIADO; NORMAN GARCÍA; GABRIELA PREVITALI; CÉSAR CASALE

Río Hondo. Santiago del Estero.

Congreso; Congreso de Fisicoquímica; 2005

Sociedad Argentina de Fisicoquimica

Una de las terapias para el tratamiento del cáncer en creciente desarrollo es la fotodinámica, en la que el Oxígeno Singlete Molecular (O2(1Dg)) juega un rol fundamental. En la célula, los microtúbulos del citoesqueleto son unos de los focos celulares más importantes de acción combinada de fotosensibilizador/luz/oxígeno. La tubulina, la principal proteína constituyente de los microtúbulos, está constituida por las subunidades a y b. Existen varias isoespecies de cada una de ellas como productos de modificaciones post-traducción. La falta de alguna de estas isoespecies en la célula podría afectar la viabilidad celular y otras funciones aun no conocidas. El efecto de  procesos fotosensibilizados sobre las diferentes isoespecies de tubulina puede dar respuestas a puntos de sumo interés acerca del conocimiento sobre  focos celulares donde actúan los fotosensibilizadores. Recientemente nosotros encontramos que después de la irradiación, la tubulina conserva su peso molecular y reconoce anticuerpos para a-tubulina y tubulina acetilada, pero pierde su capacidad de formar microtúbulos in vitro (Castillo C. y col ELAFOT 2004). La incapacidad de la tubulina irradiada de formar microtúbulos podría deberse a la modificación del sitio de union a GTP, nucleótido indispensable para el ensamblaje de tubulina. El sitio de unión del GTP a la tubulina es el mismo utilizado por drogas estabilizantes de microtúbulos tales como el taxol, la perdida de la union GTP-tubulina podría afectar también la unión taxol-microtúbulos.  Por esto, en este trabajo se estudio el efecto de la irradiación fotosensibilizada sobre los binding: a) GTP-tubulina y b) taxol-microtúbulos. Los resultados muestran que la tubulina pierde su capacidad de unir GTP y los microtúbulos a taxol. Estos resultados sugieren que la tubulina irradiada posee cambios moleculares sobre los aminoácidos que impiden su unión a GTP y consecuentemente pierde su capacidad de formar microtúbulos. Estos cambios moleculares podrían ser la incorporación de oxígeno debido a reacción con O2(1Dg), ya descripta para aminoácidos aislados, péptidos y proteínas.