Alcohol bencílico modula el transporte mediado por Mrp2 en duplas aisladas de hepatocitos de rata

CROCENZI, FERNANDO A; OCHOA, J ELENA; PELLEGRINO, JOSÉ M; SANCHEZ POZZI, EJ

Buenos Aires

Congreso; XII Latinoamerican and First Ibero-America Congress of Physiological Sciences. IBERO-ALACF 2006; 2006

Asociación Latinoamericana de Ciencias Fisiológicas

Mrp2 es un transportador ATP-dependiente, presente en la membrana canalicular del hepatocito que exporta aniones orgánicos hacia bilis. Se ha demostrado que la actividad de Mdr1, otro transportador canalicular, es modulada por la fluidez de la membrana por lo que elobjetivo de este trabajo fue evaluar el efecto del alcohol bencílico (AB), un fluidificante de membrana, sobre la actividad de Mrp2. Como modelo de estudio se utilizó el tranporte del sustrato fluorescente glutation metilfluoresceina (GMF) en duplas aisladas de hepatocitos de rata. Las duplas fueron preincubadas por 5 min con AB a diferentes concentraciones (0.5, 1, 2, 5 y 10 mM) y luego fueron expuestas por 15 min a 5-clorometilfluoresceina diacetato que por la acción de esterasas intracelulares se transforma en GMF. A los 15 min, se determinó el porcentaje de duplas que acumularon GMF mediante un microspio de fluorescencia. Además,se tomaron fotografías para medir fluorescencia canalicular y celular y estimar la fracción de fluorescencia dentro del canalículo. Resultados (N=3 a 9 preparaciones): Duplas que acumularon: Control: 65±1%; AB 0.5mM: 73±2%a; AB 1mM: 69±1%; AB 2mM:62±1%b; AB 5mM: 52±1%a,b; AB 10mM: 39±3%a,b (a diferente de Control, b diferente de AB 0.5mM, p<0.05). Fracción de fluorescencia celular correspondiente al canaliculo en células que acumularon: Control: 10±2%; AB 0.5mM: 7±2%; AB 1mM: 8±2%; AB 2mM: 8±2%;AB 5mM: 8±2%; AB 10mM: 8±2%. Conclusión: El tratamiento mejoró el transporte mediado por Mrp2 a concentraciones bajas de AB y lo empeoró a concentraciones altas, lo que sugeriría que existe una situación de fluidez óptima para la actividad de Mrp2. La relevanciade este efecto de la fluidez en la fisiopatología de la colestasis o en su tratamiento necesita estudios posteriores.