Fosfatidilinositol-3 quinasa está involucrada en la alteración secretora de sales biliares inducida por estradiol-17ß-glucurónido en duplas aisladas de hepatocitos de rata.

A CROCENZI, FERNANDO; SANCHEZ POZZI, EJ; PEREZ, LEONARDO MARTÍN; BASIGLIO, CECILIA L; ELENA OCHOA, J; M PELLEGRINO, JOSÉ; D MOTTINO, ALDO; G ROMA, MARCELO

Mar del Plata

Congreso; Reunión Anual de la SAIC; 2005

Sociedad Argentina de Investigación Clinica

PI3K modula diversos procesos hepatocelulares, incluyendo la función secretora biliar. Su activación es requerida en cuadros colestásicos, como aquel inducido por taurolitocolato. E17G es un metabolito estrogénico endógeno colestásico que ha sido postulado como posible mediador en la colestasis gravídica. En este trabajo, evaluamos el rol de PI3K en la disfunción secretora de sales biliares inducida por E17G en DAHR. Las DAHR fueron obtenidas mediante doble perfusión con colagenasa, enriquecidas mediante elutriación y cultivadas 5 hs para permitir la recuperación de su polaridad secretora. Luego, se incubaron con el inhibidor de PI3K Wortmanina (WM, 100 nM y 1μM, 45 min) y posteriormente con E17G (50 μM, 20 min) en presencia de WM. Finalmente, se adicionó una sal biliar fluorescente, la colil-lisilfluoresceína (CLF) durante 5 min para permitir su captación y luego se agregaron nuevamente los compuestos en estudio para evaluar su efecto sobre el transporte canalicular. Se cuantificó, a partir de microfotografías, el porcentaje de DAHR que mostraban fluorescencia visible en sus vacuolas canaliculares (test de acumulación canalicular de CLF, acCLF), así como la cantidad de CLF acumulada en dichas vacuolas (como porcentaje de CLF celular total). Los resultados (media±ES) se analizaron por ANOVA. La acCLF fue disminuida por E17G (16±2 vs 68±4; p<0,05 vs control). WM no afectó a ambas dosis la acCLF y previno el efecto de E17G (WM 100nM+E17G: 24±2; WM 1μM+E17G: 34±3; p<0,05 vs E17G y control). La cantidad de CLF acumulada apicalmente fue disminuida por E17G (5,9±0,4 vs 14,1±1,1; p<0,05 vs control); este efecto fue parcialmente prevenido por WM (9,1±0,7; p<0,05 vs E17G y control). Concluimos que la alteración del transporte de sales biliares inducida por E17G depende parcialmente de la activación de PI3K inducida por este agente colestásico.