Internalización del virus Pixuna a la célula hospedadora: rol de la clatrina en la endocitosis

GOMEZ EMILIANO; GIL PEDRO; KUNDA, PATRICIA; PAGLINI MARÍA GABRIELA

CORDOBA

Jornada; XVIII Jornada de Investigación Científica de la FCM-UNC (JIC); 2017

El género Alphavirus presenta gran importancia epidemiológica ya que sus miembros pueden ser transmisores de importantes enfermedades, tanto en el hombre como en animales domésticos. El virus Pixuna (PIXV) es un miembro enzoótico no patógeno, incluido en el complejo antigénico de Encefalitis Equina Venezolana, perteneciente al grupo de los Alphavirus del Nuevo Mundo. Existen evidencias que los Alfavirus utilizan distintas vías de ingreso a la célula hospedadora, siendo la endocitosis mediada por clatrina una de las más utilizadas.Se sabe que uno de los miembros del complejo de Encefalitis Equina Venezolana (EEV), el PIXV, ingresa a la célula por endocitosis mediada por receptores. Sin embargo, aún no se conoce el mecanismo molecular ni la identidad de las proteínas que median su internalización. Por lo tanto, es posible hipotetizar que el PIXV ingresa a la célula hospedadora por medio de endocitosis mediada por receptores dependiente de clatrina, para seguir la vía endocítica hasta lograr denudarse y continuar con los pasos del ciclo de replicación. Con estas consideraciones, nos propusimos investigar si clatrina participa en la endocitosis del PIXV. Para ello, usamos plásmidos de expresión conteniendo los cDNA correspondientes a la forma salvaje o mutante dominante negativa para la proteína EPS15 acoplados a la proteína verde fluorescente (GFP), una proteína de la membrana plasmática presente en las fosas recubiertas de clatrina. Mediante transfección transiente en células Vero, se analizó el efecto de la sobreexpresión de las mismas y las muestras fueron procesadas por inmunofluorescencia. Los resultados, muestran que: 1) Las formas salvaje y mutada de Eps15 son funcionales; 2) Hay una disminución significativa en la internalización de viriones en las células VERO que sobreexpresan la forma dominante negativa de Eps15; y 3) No hubo cambios en la internalización de viriones entre células VERO no transfectadas y transfectadas con la forma salvaje de Eps15. Estos resultados sugirieren que clatrina es responsable, al menos en parte, de la entrada del PIXV a la célula. Según lo expuesto, y en conocimiento de la diversidad de mecanismos de entrada de los Alphavirus a la célula hospedadora, consideramos importante investigar otras posibles vías de internalización del PIXV.