Recubrimiento y direccionamiento de nanopartículas de oro para aplicaciones teranósticas

ACHILLI, ESTEFANIA; FLORES, CONSTANZA Y.; FACUNDO TEMPRANA; DEL V. ALONSO, SILVIA; GRASSELLI, M.

Berisso

Encuentro; XVIII Encuentro de Superficies y Materiales Nanoestructurados ; 2018

YTEC-UNLP

La funcionalización superficial de las nanopartículas de oro (Au-NPs) con diferentes biomoléculas se ha utilizado durante varias décadas en pruebas de diagnóstico rápido. En los últimos años, se ha demostrado que las Au-NPs pueden tener aplicaciones en terapia y diagnóstico in vivo. Esta plataforma de nanomateriales tiene la potencialidad de combinarse para generar NPs teranósticas.Con el fin de lograr una terapia dirigida a algunas células determinadas, es obligatorio el uso de NPs con direccionamiento mediante péptidos, moléculas orgánicas o proteínas específicas. Además de eso, es necesario reducir las interacciones inespecíficas con otras proteínas que reducen fuertemente la disponibilidad e interacción de las NP con el blanco. Recientemente, se ha reconocido que la naturaleza superficial de las NPs y su interacción con las proteínas séricas, tambien conocido como efecto corona, tiene un papel fundamental en el destino final de las mismas en el cuerpo. Por lo tanto, el proceso de recubrimiento se convirtió en un tema estratégico para desarrollar nanomateriales funcionales.En el presente trabajo se describe la preparación y caracterización de NPs híbridas de oro/Albúmina (Au-Alb-NPs) decoradas con el peptido Bombesina-DOTA. El péptido Bombesina es reconocido por el receptor GRP presente en varios tipos de células tumorales, como las de cáncer de próstata y mama, es que utilizado para el direccionamiento. El recubrimiento con Alb potencialmente reducirá el efecto corona; mientras que el quelante DOTA permitirá el transporte de radionucleídos con fine de diagnostico y/o tratamiento.La estrategia de preparación involucra el uso de una técnica de recubrimiento en multicapa con Alb y entrecruzamiento inducido por radiación gamma, recientemente desarrollada por nuestro laboratorio [1-3]. Las nanoestructuras obtenidas, de diametro promedio entre 80 nm y 120 nm, son caracterizadas por TEM, DLS, espectroscopía UV-Visible; mientras que la determinación de Bombesina-DOTA en las NPs se realiza por MALDI TOF/TOF e, indirectamente, mediante ICP-AES a traves de la quelacion de Pb(II). La activacion del péptido para la decoracion es estudiado por espectrometría de masas ESI/MS.La captación bioespecífica de las NPs es estudiada por Citometría de Flujo en cultivos de células PC-3. La misma se realizó de forma comparativa sobre Au-NPs monocapa preparadas por adsorción física y recubrimiento multicapa, ambas decoradas con Bombesina-DOTA. Las NPs multicapa decoradas presentan una menor adsorción inespecífica y mejor reconocimiento por las celulas tumorales que los controles, en medios con alto contenido de suero.