Funcionalizacion interna de nanoconductos perfectos en lms de PET con protenas inmovilizadas

SILVIA SOTO ESPINOSA; GIULIANA ESPOSITO; CLAUDIA ARBEITMAN; MARIANO GRASSELLI

Bariloche

Encuentro; XVI Encuentro ?Superficies y Materiales Nanoestructurados?; 2014

CNEA-Conicet-INVAP

El desarrollo de nuevos materiales ha tenido un salto cualitativo a partir del impulso de la nanotecnologa. Nuestro laboratorio realiza modicaciones en escala mi- cro y nanometrica de polmeros sinteticos, a traves del uso de radiaciones ionizantes, para aplicaciones biologicas. En este trabajo se presenta la funcionalizacion de los nanoconductos de 32313 nm de diametro formados en membranas track-etched con protenas especcas. Las membranas fueron sintetizadas a partir de lms de PET irradiados con iones pesados, sensibilizado con UV y nalmente un grabado qumico con NaOH, que regula el diametro de poro. Inmediatamente despues, las membranas fueron modicadas qumicamente va polimerizacion iniciada en radicales remanentes, lograndose as la incorporacion de injerto sitio-especca sobre las paredes internas de los nanoconductos. Las protenas Green Fluorescent Protein (GFP) y la enzima  lactamasa fueron inmovilizadas covalentemente sobre el injerto. Las modicaciones se caracterizaron por microscopa confocal y fuorometra; mientras que los parametros cineticos se obtuvieron aplicando el modelo de Michaelis Menten. Las membranas inmovilizadas con GFP variaron su fluorescencia con los cambios de pH del entorno, mientras que la lactamasa inmovilizada hidrolizo el sustrato especco con una Km 0,015 M y Vmax 2500 RFU/min , mientras que para la enzima libre se obtuvo 0,09 M y 10000 RFU/min respectivamente. Los resultados encontrados sugieren que es posible agregar funcionalidad en los nanoconductos de membranas polimericas a traves de la inmovilizacion de enzimas y protenas, lo que abre la posibilidad de su utilizacion en el dise~no de sensores opticos altamente especcos. S.L.S.E. agradece a la ANPCyT por la beca otorgada. M.G. y C.A. son investigadores de CONICET. Este tra- bajo fue realizado gracias a los aportes de la Universidad Nacional de Quilmes, y el MINCyT.