Tomografía FIB-SEM: Una herramienta para el análisis de la distribución intracelular de nanopartículas en aplicaciones de hipertermia magnética

T. TORRES MOLINA; M. PILAR CALATAYUD; B. SANS; E. SOLER; R. CABREIRA GOMES; FERNÁNDEZ PACHECO, RODRIGO; C. MARQUINA; M.R. IBARRA; G.F. GOYA; A.C. MORENO MALDONADO; DE ALMEIDA, ADRIELE APARECIDA; E. LIMA JR.; NADAL, MARCELA S.; C. BERTOLI; A. BARUJ; R.D. ZYSLER

Buenos Aires - Bariloche

Encuentro; Encuentro Anual INN 2020 CNEA-CONICET; 2020

Instituto de Nanociencia y Nanotecnología CNEA-CONICET

La microscopía de haces de iones y electrones focalizados (FIB-SEM) ha sido ampliamente utilizadaen la industria de semiconductores y en ciencia de materiales como herramienta para la nano y micro fabricación de dispositivos electrónicos, reparación de máscaras para litografía, preparación de lamelas para TEM, entre otras. Hoy en día existe una gran cantidad de datos experimentales en materiales orgánicos y biológicos que demuestran el potencial de esta técnica para aplicaciones biomédicas [1-3]. La hipertermia de fluido magnético (HFM), utiliza nanopartículas magnéticas (NPMs) previamente cargadas en el interior celular como fuentes de calentamiento producido por el desfasaje entre el momento magnético de las NPMs y un campo magnético alterno. Debido a que ellas funcionan como fuentes de calor, la cantidad y distribución final de las mismas en el espacio intracelular son parámetros de relevancia en cualquier modelo de muerte celular inducida por HFM.En este trabajo se presentan resultados utilizando FIB-SEM en neuroblastomas y células microgliales cargadas con NPMs (Fe3O4, MnFe2O4 y CoFe2O4) y sometidas a HFM. Las células se sembraron y se fijaron directamente en cubreobjetos, luego se seccionaron y se analizaron para explorar la distribución final de las NPMs. Además, una serie de células cargadas con NPMs fueron fijadas en resina polimérica después de la aplicación de HFM, lo que nos permitió utilizar el protocolo de ?corte y visualización? para identificar los cambios en la morfología celular y la integridad de la membrana a través de la reconstrucción 3D. Finalmente, serán presentados resultados preliminares, utilizando la reciente infraestructura disponible en el CAB, obtenidos en células microgliales cargadas con NPMs de ZnxFe3-xO4.