Efecto de los buffers biológicos sobre la actividad de tipo-peroxidasa de las nanopartículas magnéticas de Fe3O4

M. RAINIERI ANDERSEN; E.L. WINKLER; T. TORRES MOLINA; M. VASQUEZ MANSILLA; NADAL, MARCELA S.; R.D. ZYSLER; E. LIMA JR.

Buenos Aires - Bariloche

Encuentro; Encuentro Anual INN 2020 CNEA-CONICET; 2020

(Instituto de Nanociencia y Nanotecnología CNEA-CONICET

Las nanopartículas magnéticas de óxido de hierro (MNPs) son frecuentemente utilizadas en aplicaciones biomédicas debido a sus propiedades magnéticas y a su estabilidad química. No obstante, en determinadas condiciones de pH y temperatura, poseen la capacidad de emular la actividad enzimática de la peroxidasa al catalizar la descomposición del peróxido de hidrógeno y producir radicales libres. Esta actividad intrínseca que poseen las NPMs de emular la actividad de algunas enzimas puede verse afectada por factores externos como la solución buffer utilizada ya que las especies de la solución reguladora podrían interactuar con la superficie de las partículas. El objetivo de este trabajo fue evaluar actividad catalítica de las partículas en distintos buffers y condiciones experimentales a través del análisis de la producción de radicales libres del oxígeno mediante la técnica de EPR utilizando al DMPO como atrapador de spin. Asimismo, estudiamos la cinética de reacción mediante la espectroscopía UVvisible y utilizando los sustratos de la enzima peroxidasa (TMB y DAB). Nuestros resultados indican que la oxidación del TMB y el DAB, al igual que la producción de radicales libres, fue mayor en buffer acetato y mostró ser mucho menor y dependiente de la concentración y del pH en buffer fosfato. Resultados similares fueron obtenidos luego de la adición de bicarbonato al buffer HEPES. Al evaluar si la misma reacción era llevada a cabo con sales de hierro, no observamos oxidación del TMB. Sin embargo, cuando añadimos sales de hierro en presencia de NPMs, la oxidación de TMB fue más alta que la observada al duplicar la concentración de NPMs. Nuestros resultados indican que la elección del buffer al momento de evaluar la actividad catalítica de las NPMs y sus potenciales efectos toxicológicos debería ser considerada, ya que, en condiciones fisiológicas de pH, salinidad y especies reguladoras del pH, la actividad de tipo-peroxidasa se encontró dramáticamente reducida.