Modulación de la quimiorresistencia en cáncer colorectal. Generación de modelos de estudio y desarrollo de nanovectores para transporte de ARN de interferencia

M. BATALLA; M. CERDA; E. SALVATIERRA; O. PODHAJCER; M.L. MOJICA PISCIOTTI; E. LIMA JR.; R.D. ZYSLER; C. PLANK; H. DURAN; L. POLICASTRO

La Falda, Córdoba

Congreso; XII Encuentro "Superficies y Materiales Nanoestructurados 2012"; 2012

La quimioresistencia es una de las principales causas de fracaso de los tratamientos oncológicos. En particular, el 5-fluorouracilo (5-FU) es la droga quimioterapéutica más utilizada para el tratamiento del cáncer colorectal. Sin embargo, la respuesta de los pacientes es solo del 15%, y en combinación con otras drogas como el oxaliplatino se obtiene una mejora en la respuesta del 40-50%. El objetivo de este trabajo es desarrollar un modelo en cáncer de colon para futuros estudios de quimiosensibilizacion mediada por el silenciamiento de genes asociados a la quimioresistencia utilizando nanovectores. Hemos desarrollado tres sublíneas celulares resistentes al 5-FU a partir de las líneas Caco-2, T-84 y HCT-116, denominadas Caco-2R, T-84R y HCT-116R respectivamente. Las sublíneas resistentes (SLR) se desarrollaron a partir de cultivos de las líneas parentales (LP) en dosis crecientes de 5-FU durante 6 meses. Las SLR mostraron 8-10 veces un incremento en la dosis inhibitoria 50 (IC50) respecto de las LP (p<0.01). La tasa de proliferación fue significativamente menor en las SLR respecto de las LP (p<0.01). También hemos obtenido un clon de la línea Caco-2 expresando la luciferasa de manera estable, a fin de generar un sistema de estudio para la optimización de nanovectores portadores de miRNA o siRNAs. Finalmente, hemos desarrollado modelos de estudio tridimensionales (3-D) de los modelos mencionados anteriormente.En relación con el desarrollo de nanovectores, hemos generado sistemas liposomales de 146nm y por otro lado hemos acomplejado un plásmido conteniendo un microARN contra la luciferasa a nanopartículas magnéticas recubiertas con polietilenimina(1)(2)(3). Estos complejos silenciaron en un 80% de la expresión de la luciferasa en presencia de un campo magnético (p<0.01). Se espera, en la siguiente etapa, encapsular los complejos nanopartículas magnéticas-ADN plasmídico en los sistemas liposomales.