Anticuerpos anti-idiotipos que reconocen estructuras relacionadas al disacárido de Thomsen-Friendenreich son generados a partir de la lectina de Agaricus bisporus.

SENDRA, VICTOR G.; NORES GUSTAVO A. AND IRAZOQUI FERNANDO J

Mar del Plata. Argentina.

Congreso; SAIC; 2004

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Anticuerpos anti-idiotipos que reconocen estructuras relacionadas al disacárido de Thomsen-Friendenreich son generados a partir de la lectina de Agaricus bisporus Victor G. Sendra, Gustavo A. Nores, Fernando J. Irazoqui CIQUIBIC-CONICET / Departamento de Química Biológica, Facultad de Ciencias Químicas, Universidad Nacional de Córdoba, Córdoba, Argentina. Oligosacáridos de las cadenas de O-glicanos de mucinas están frecuentemente sobre-expresados y aberrantemente glicosilados en células de tumores epiteliales. El core 1 (Galbeta1-3GalNAcalpha-O-) de O-glicanos tipo mucinas, también llamado disacárido de Thomsen-Friedenreich (TFD), es un ejemplo de estructuras crípticas que se sobreexponen en células tumorales debido a modificaciones en el perfil de sus glycosiltransferasas. La lectina de Agaricus bisporus (ABL), es una proteína que reconoce principalmente a TFD, y posee además la característica de ser un inhibidor de la proliferación de células de tumores epiteliales. El objetivo del presente trabajo fue desarrollar anticuerpos anti-idiotipos con la intención de conseguir una respuesta inmune que revele una especificidad de reconocimiento similar a ABL. Con este propósito se realizó una purificación por cromatografía de afinidad de ABL, para utilizar esta lectina como primer molde en la generación de anticuerpos. Se inmunizaron conejos con ABL, generando altos títulos de anticuerpos que fueron cuantificados por ELISA. Luego se purificaron IgG no inmune y anti-ABL mediante la utilización de Proteína G-sepharosa. La fracción de IgG anti-ABL fue ofrecida a una columna cromatográfica de ABL-sepharosa para purificar la fracción específica de IgG anti-ABL. Estas IgGs fueron utilizadas como inmunógenos de ratones, a los que se les estudió la respuesta inmune humoral. Los anticuerpos así obtenidos (IgG e IgM) fueron capaces de reconocer glicoproteínas secretadas por la línea tumoral T47D. Dicho interacción fue inhibida por estructuras relacionadas a TFD. Estos anticuerpos también mostraron un mayor título de anticuerpos anti-células tumorales (T47D y HT29) que los controles, e inhibidos parcialmente por moléculas relacionadas a TFD. Por lo que se concluye que la utilización de ABL como primer molde en la generación de anticuerpos anti-idiotipos es una alternativa válida como variante estratégica en la generación de anticuerpos que reconocen estructuras relacionadas a TFD.