Hacia una vacuna multiepitopica para la babesiosis bovina

DOMINGUEZ, M; WILKOWSKY, S.; TABOGA, O.; FARBER, M.; ALCARAZ, E.; ECHAIDE, I.; MOSQUEDA, J.; SUAREZ, C.; MONICA OFELIA JACOBSEN

Acta Bioquimica Clinica Latinoamericana

Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires

Año: 2005 p. 90 - 90

Las infecciones de bovinos con el hemoparásito protozoario Babesia bovis son causa de grandes perdidas economicas e importantes limitaciones en la explotación ganadera en vastas regiones del mundo donde se desarrolla su vector, la garrapata. La vacunación con cepas atenuadas es una de las medidas en uso para su control. Si bien son efectivas, estas vacunas presentan inconvenientes que resaltan la importancia de desarrollar una vacuna a subunidades. Este trabajo tiene por objeto la identificación de epitopes B en antigenos de superficie de Babesia bovis, que estén ampliamente conservados entre distintos aislamientos. En este trabajo nos hemos enfocado en los miembros de la familia Variable Merozoite Surface Antigens (VMSA) de B. bovis. Los genes msa-1, msa-2 a1, msa-2a2, msa-2b y msa-2c de distintos aislamientos de Argentina, USA, Mexico y Brasil fueron amplificados por PCR, clonados en pCR2.1. y secuenciados. Mediante análisis bioinformático se detectaron en las secuencias predecidas de aminoácidos regiones altamente conservadas que contienen posibles epitopes B de entre 20 y 40 aminoácidos. Se diseñaron los oligonucleotidos 5´-3´y 3´-5correspondientes, con sitios de restricción para XHO 1 y BANH 1 en sus extremos, y se clonaron en el vector pGEX, seguido de transformación de células DH5 alfa. Se purificaron plásmidos a partir de varias colonias seleccionadas al azar, y se digirieron con dichas enzimas, para analizar la presencia de insertos, por electroforesis en geles de poliacrilamida. Se prevé la expresión de los peptidos con IPTG….. y el análisis de la presencia de epitopes B conservados por dot blots usando sueros de animales de campo de distintas regiones geograficas, positivos para B. bovis. En estudios subsiguientes se utilizará este mismo enfoque para la identificación de epitopes B conservados presentes en otros candidatos vacunales para este parásito. Los epitopes B superficialmente expuestos en el parásito están sometidos a la permanente presión de selección del sistema inmune del bovino. Por tanto, su conservación entre cepas distantes geográficamente sugiere un impedimento funcional a la variabilidad, constituyendo así blancos adecuados para una vacuna a subunidades. Dado que una vacuna multiepitopica ha sido efectiva en estudios experimentales contra un parásito muy cercano a B. bovis, Plasmodium falciparum, este enfoque puede llegar a ser exitoso en el caso de la babesiosis bovina. (Este trabajo fue financiado por CONICET, ANPCyT e INTA: PICTR 2002-00054, y PICTO 08-12920)