Tipificación molecular de aislamientos de Babesia bovis a traves del uso de minisatelites.

MORETTA, R.; MONICA OFELIA JACOBSEN; SUAREZ, C.; FARBER, M.; WILKOWSKY, S.

ACTA BIOQUíMICA CLíNICA LATINOAMERICANA

Federación Bioquímica de la Provincia de Buenos Aires

Año: 2005 p. 89 - 89

0325-2957

La babesiosis bovina causada por el protozoario Babesia bovis es una enfermedad hemoparasitaria que produce anemia, pérdida marcada de peso, aborto y muerte provocando importantes pérdidas económicas a la ganadería. Además constituye un serio impedimento para la producción bovina en las zonas afectadas. El estudio de la diversidad poblacional a nivel genético permite correlacionar factores tales como transmisibilidad, virulencia y las posibles causas de fallas vacunales. Sin embargo este es un aspecto que aún no ha sido suficientemente abordado debido a la escasez de marcadores moleculares disponibles. El objetivo del trabajo fue encontrar secuencias de DNA que contuvieran repeticiones en tándem de tipo minisatélites (variables en el número de módulos repetitivos) para la tipificación de aislamientos de B. bovis. Se utilizó la información proveniente del Babesia bovis ESTs Sequencing Project del Sanger Institute (http://www.sanger.ac.uk/Projects/B_bovis/) para seleccionar las secuencias que estuvieran contenidas en marcos de lectura abiertos y la información del proyecto de secuenciación del genoma de B. bovis en la Washington State University, USA para descartar la presencia de intrones en el diseño de la PCR. La búsqueda se realizó con el programa Tandem Repeat Finder (http://tandem.bu.edu). Entre las secuencias encontradas se eligieron 3 denominadas Bv200, Bv80 y Bv785. En el presente trabajo se analizaron por PCR seguida de electroforesis en gel de agarosa, 11 aislamientos provenientes de Estados Unidos, Brasil y Uruguay y diferentes regiones de Argentina y Mexico. Se obtuvieron resultados positivos para Bv200 y Bv80 ya que fue posible amplificar las secuencias  correspondientes en todos los aislamientos. Asimismo se observó un claro polimorfismo en el tamaño de los productos amplificados lo que sugiere la presencia de un número variable de repeticiones presentes. Las pruebas de PCR desarrolladas constituyen una herramienta de laboratorio fácil de implementar para la identificación y caracterización de aislamientos de B.bovis. Futuros estudios de genómica comparativa permitirán  avanzar en la compresión del rol funcional de estos minisatélites.