La inducción de hemoxigenasa 1 previene la injuria colestásica oxidativa en la rata

CECCATTO P.; OCAMPO ALZATE C.D.; ARRIAGA S.M.; BOAGLIO A.C.; SÁNCHEZ POZZI E.J.; MOTTINO A.D.; SÁNCHEZ POZZI E.J.; ROMA M. G.; BASIGLIO C.L.

La Plata

Congreso; Reunión Anual 2016 de la Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS); 2016

Sociedad Argentina de Fisiología (SAFIS)

Previamentedemostramos que concentraciones fisiológicas de bilirrubina previenen la fallasecretora biliar inducida por estrés oxidativo (EO) en modelos in vitro. En este trabajo evaluamos el efecto de la inducción dehemoxigenasa 1 (HO1) y el consecuente aumento en los niveles de bilirrubina sobrela injuria colestásica inducida por EO invivo. Ratas Wistarmacho adultas se trataron con hemina (5-20 mg/kg p.c.) y se determinaron lasconcentraciones de bilirrubina en bilis,la cual se encontró significativamente aumentada para 20 mg/kg p.c. (12,6± 2,5 mg/dl vs 5,3 ± 0,6 mg/dl parael vehículo, p<0,001, n = 4); estocoincide con un aumento del 60% en los niveles hepáticos de HO1 (p<0,05 vs Control, n = 3). Lainjuria colestásica oxidativa se indujo utilizando el agente pro-oxidante tert-butil hidroperóxido (tBuOOH, 220-880 µmol/kg p.c.) y se monitoreó el flujo biliar, encontrándoseque disminuye significativamente a partir de 440 µmol/kg p.c. (p<0,05 vs Control, en todo el período de tiempo estudiado, n = 6). Una vez seleccionadas las dosis de hemina (20 mg/kg p.c.) y de tBuOOH(440 µmol/kg p.c.), se estudió el efecto de la inducción de HO1 sobrela colestasis por EO. El flujo biliar, monitoreado entre las 4 y 6 hpost-tBuOOH, disminuyó significativamente(1,30 ± 0,03 µl/min/g hígado vs Control 1,56 ± 0,01 µl/min/g hígado, p<0,01, n = 6) y el pretratamiento con hemina previnocompletamente esta disminución (1,65 ± 0,04 µl/min/g hígado, n = 6, p<0,01 vs tBuOOH). El estado redox se evaluó midiendo los niveles demalondialdehído generado, así como de las defensas antioxidantes. Encontramosque tBuOOH provocó un aumento de lalipoperoxidación (0,170 ± 0,022 UA vsControl 0,090 ± 0,005 UA, p<0,05, n= 6), mientras que el pre-tratamiento con hemina previno este incremento (0,082± 0,001 UA, p<0,05 vs tBuOOH, n = 6). La actividad de catalasa seencontró aumentada en el grupo tBuOOH,y el pretratamiento con hemina previno este aumento (p<0,05 vs tBuOOH,n = 3). Por el contrario, para laenzima superóxido dismutasa se encontró que tBuOOHdisminuyó la actividad y el pretratamiento con hemina previno esta disminución(p<0,05 vs tBuOOH, n = 3). Concluimosque tBuOOH genera un estadopro-oxidante, y que la inducción de HO1 y la consecuente elevación debilirrubina protege alhígado de esta injuria oxidativa y previene la colestasis que se origina. Estocontribuiría a limitar la progresión de hepatopatías colestásicas que cursancon EO.