INVESTIGADORES
ROMA Marcelo Gabriel
congresos y reuniones científicas
Título:
Concentraciones fisiológicas de bilirrubina no conjugada (BNC) previenen la colestasis inducida por estrés oxidativo (EO) en el hígado aislado y perfundido de rata (HAPR)
Autor/es:
BASIGLIO C.L.; TOLEDO F.D.; ARRIAGA S.M.; BOAGLIO A.C.; OCHOA J.E.; SÁNCHEZ POZZI E.J.; MOTTINO A.D.; ROMA M.G.
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC); 2013
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
En
duplas de hepatocitos, demostramos que el
agente pro-oxidante modelo tert-butilhidroperóxido
(tBOOH) produce internalización endocítica de transportadores
canaliculares responsables de la formación de bilis (Bsep y Mrp2), por
alteración del citoesqueleto de actina. La bilirrubina, considerada actualmente un
importante antioxidante endógeno, podría
limitar la colestasis por EO, como
lo sugieren resultados in vitro de nuestro grupo. El presente trabajo tiene como
objetivo confirmar la capacidad de BNC
para limitar las alteraciones de la función secretora biliar inducidas por tBOOH en el HAPR, un
modelo que mantiene la integridad del órgano intacto. Se evaluaron cambios
temporales en: a) la relación entre
glutatión oxidado (GSSG) y total (oxidado+reducido, GSHt) en bilis; b) el flujo biliar; c) la excreción biliar del sustrato de Bsep taurocolato (TC) y d) la excreción biliar del sustrato de
Mrp2 dinitrofenil glutatión (GS-DNP). En tejido hepático, se evaluó por
microscopía confocal la localización de Bsep y Mrp2 y del citoesqueleto de
actina, por doble tinción con anticuerpos primarios y secundarios fluorescentes
(para Bsep y Mrp2) y faloidina-Alexa Fluor 568 (para actina). tBOOH indujo un aumento agudo y
transitorio en la relación GSSG/GSHt (+167±28%) y una disminución abrupta del flujo
biliar (-71±3%), así como de la excreción de TC (-46±12%) y de GS-DNP (-130±37%).
La pre-perfusión con BNC (17 µM) previno todos estas alteraciones (p<0,05;
n=4). BNC previno casi completamente
la desorganización del citoesqueleto
de actina y la internalización endocítica de Bsep y Mrp2 inducidas por tBOOH. Concluimos que la acción antioxidante
de concentraciones fisiológicas de BNC contrarrestan la alteración de la
función secretora biliar producida por EO, manteniendo la integridad del
citoesqueleto y, consecuentemente, la localización de los transportadores
canaliculares, lo cual podría contribuir a limitar la progresión de
hepatopatías colestásicas que cursan con EO.