INVESTIGADORES
ROMA Marcelo Gabriel
congresos y reuniones científicas
Título:
Papel de las proteínas quinasas activadas por mitógeno (MAPKs) en la alteración de la función secretora canalicular inducida tert-butilhidroperóxido (tBOOH) en duplas de hepatocitos de rata (DAHRs).
Autor/es:
TOLEDO, F.D.; BASIGLIO, C.L.; BOAGLIO, A.C.; SÁNCHEZ POZZI E.J.; ROMA M.G.
Lugar:
Mar del Plata
Reunión:
Congreso; LV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2010
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC)
Resumen:
Estudios previos de nuestro
grupo demostraron que el agente pro-oxidante modelo tBOOH induce alteraciones en la función secretora hepatocanalicular
de DAHRs vía activación de isoformas de proteína quinasa C
dependientes de Ca2+. Estas quinasas median la desorganización del
citoesqueleto de actina, con la consecuente disrupción de las uniones estrechas
intercelulares y la internalización endocítica de transportadores canaliculares
responsables de la formación de bilis Bsep y Mrp2. Dado que las MAPKs podrían actuar como efectores cascada abajo de cPKC,
en este estudio indagamos la participación de
vías de señalización de las isoformas de MAPKs del tipo ERK, JNK y p38MAPK
en los efectos deletéreos funcionales del tBOOH
en DAHRs, un modelo polarizado in vitro para el estudio del transporte
hepatobiliar. tBOOH (125 µM)
disminuyó la capacidad de las DAHRs para secretar
ápicalmente el sustrato de Bsep colil-lisil-fluoresceína (-50±4%, p<0.005).
Los inhibidores selectivos de MAPKs del tipo ERK 1/2 (PD098059, 50 mM), del tipo JNK (SP600125, 10 µM) y del tipo p38MAPK (SB203580 50 µM) previnieron
parcialmente esta alteración (PD098059: +28±5; SP600125: +34±5; SB203580:
+29±4; >200 duplas en cada grupo, n = 6, p<0.05). Esencialmente, los
mismos resultados se obtuvieron con el sustrato de Mrp2
glutation-metil-fluoresceína (generado intracelularmente a partir de diacetato
de clorometil-fluoresceína). Técnicas de inmunomarcado seguido de microscopía
confocal revelaron que tBOOH (125 µM) indujo marcada internalización de Bsep y Mrp2, y que el pretratamiento con los diferentes
inhibidores de MAPKs previnieron parcial pero significativamente estas
alteraciones. Concluimos que las MAPKs del tipo p38MAPK, ERK
y JNK participan parcialmente en las alteraciones funcionales inducidas por
tBOOH sobre la capacidad de DAHRs para secretar sales biliares al
canalículo biliar promoviendo la internalización endocítica de transportadores
canaliculares.