La bilirrubina no conjugada (BNC) previene la injuria oxidativa hepatocelular

BASIGLIO C.L.; TOLEDO, F.D.; SÁNCHEZ POZZI E.J.; MOTTINO A.D.; ROMA M.G.

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica (SAIC).

Estudios previos de nuestro grupo demostraron que el estrés oxidativo (EO) provoca colestasis por internalización endocítica de transportadores canaliculares responsables de la formación de bilis (Bsep y Mrp2); este hecho estaría involucrado en la patogénesis y progresión de hepatopatías, las que cursan mayoritariamente con EO asociado. La bilirrubina es un potencial antioxidante endógeno cuyos niveles plasmáticos aumentan en hepatopatías, pero su papel citoprotector en estas condiciones es incierto. El objetivo de este trabajo es evaluar la capacidad de BNC para limitar la injuria oxidativa hepatocelular y las alteraciones de localización y función de transportadores canaliculares asociada a la misma, usando el tert-butilhidroperóxido (t-BOOH) como pro-oxidante modelo. Hepatocitos aislados de rata se pre-trataron con BNC (1,7–17,1 µM) y luego con t-BOOH (500 µM). BNC previno en aprox. un 40% (p<0,05; n=4) la lipoperoxidación de membranas inducida por t-BOOH, evaluada por la formación de sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico (TBARS), incluso a concentraciones fisiológicas. t-BOOH (25–125 µM) disminuyó progresivamente la capacidad de duplas aisladas de hepatocitos de rata (DAHR) para secretar ápicalmente los sustratos de Bsep y Mrp2 colil-lisil-fluoresceína y glutation-metil-fluoresceína (generado intracelularmente a partir de diacetato de clorometil-fluoresceína). BNC (17,1 µM) previno esta falla secretora en aprox. un 70% (p<0,05; n=4), independientemente del sustrato analizado. Técnicas de inmunomarcado seguido de microscopía confocal revelaron que t-BOOH (125 µM) indujo marcada internalización de Bsep y Mrp2, y que el pretratamiento con BNC (17,1 µM) previno significativamente estas alteraciones. Concluimos que la bilirubina contrarresta la internalización endocítica y la subsecuente falla funcional de transportadores canaliculares relevantes para la secreción biliar. Esto sugiere un rol citoprotector funcional del pigmento en hepatopatías con EO asociado.