INVESTIGADORES
ELOLA Maria Teresa
congresos y reuniones científicas
Título:
Participación de integrinas en el efecto pro-adhesivo de la galectina-1 sobre células de carcinoma hepatocelular
Autor/es:
CARABIAS P.; MANZI, M.; ELOLA, M. T.; RABINOVICH, G. A.; WOLFENSTEIN-TODEL, C.; TRONCOSO, M. F.
Lugar:
Mar del Plata, Provincia de Buenos Aires, Argentina
Reunión:
Congreso; LIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica y Reunión Científica de la Sociedad Argentina de Fisiología; 2008
Institución organizadora:
Sociedad Argentina de Investigación Clínica
Resumen:
La galectina-1 (Gal-1) está involucrada en procesos de
homeostasis, adhesión, migración y diferenciación celular, así
como también en la transformación maligna y regulación de respuesta
inmune. Con el objetivo de investigar su rol como
modulador de la adhesión de hepatocitos utilizamos como modelo
la línea de carcinoma hepatocelular, HepG2 C3A. Previamente
demostramos que la galectina-1 recombinante (rGal-1) promueve
la adhesión de estas células. Mediante la tinción con Cristal
Violeta se observa un efecto máximo (156±5%) comparado con
las células control (100%) luego de 1 h de incubación con la rGal-
1 soluble (14 µM). La pre-incubación con lactosa previene este
efecto, sugiriendo la participación del dominio de reconocimiento
de carbohidratos. Para investigar el posible papel de la Gal-1
como un componente de la matriz extracelular, se inmovilizó la
rGal-1 (10 µg/pocillo) y se evaluó la adhesión celular, observándose
un aumento significativo (138±9%, 1h de incubación) con
respecto a los pocillos sin recubrir. Para evaluar el efecto de la
sobre-expresión de la Gal-1, las células HepG2 se transfectaron
con el plásmido pcDNA3.1-Lgals1. En estas células con alta expresión
de Gal-1 la adhesión fue significativamente mayor
(169±23%) que la de las células sin transfectar. Con el fin de
evaluar el papel de las integrinas, las células se pre-incubaron con
anticuerpos (bloqueantes) contra distintas subunidades de
integrinas. Se observó una disminución del efecto producido por
la rGal-1: Ac anti-alfa1 (83,17±0.31%), anti alfa-3 (70,77±2,53%), anti
alfa-V (84,13±2,84%) y anti alfa-1 (83,06±1,22%). Las células se preincubaron
con wortmanina (1µM), un inhibidor de la PI3K,
obteniéndose una disminución significativa del efecto producido
por la rGal-1 (133±5% vs 156±5%). Estos Resultados demuestran
que la Gal-1 promueve la adhesión de las células HepG2,
efecto en el que participan las subunidades alfa-1, alfa-3, alfa-V y alfa-1 de
las integrinas, sugiriendo la activación de, por lo menos, la vía de
la PI3K.