EFECTO DE SGT-1alfa Y 14-3-3sigma SOBRE LA REGULACIÓN DE GR Y AR

MAZAIRA GI, MOLINARI AM, ERLEJMAN AG, GALIGNIANA MD

Mar del Plata

Conferencia; LVII Reuni¨®n Anual deSAIC; 2012

Los receptores esteroidales forman complejos con Hsp90 y una prote¨ªna TPR (tetratricopeptide repeat). La orientaci¨®n de sus ¦Á-h¨¦lices antiparalelas le permite a algunas prote¨ªnas TPR asociarse con Hsp90 regulando as¨ª el retrotransporte y/o la actividad transcripcional de los receptores. Previamente demostramos que la uni¨®n de esteroide favorece el recambio de la prote¨ªna TPR FKBP51 por FKBP52, la que favorece el retrotransporte de receptores v¨ªa dine¨ªna y estimula su actividad transcripcional. Nuestro objetivo fue estudiar los efectos de otras prote¨ªnas TPR tales como 14-3-3s y SGT-1a sobre GR y AR habida cuenta que estos receptores poseen acciones opuestas en ciertos tipos de c¨¢nceres como el prost¨¢tico. Mientras que AR se comporta como un oncog¨¦n, GR es supresor tumoral. En ausencia de hormona, la fracci¨®n nuclear de GR fue significativamente menor (P¡Ü0,05) que en c¨¦lulas normales (31,5¡À4,2%) cuando se sobreexpres¨® a 14-3-3s (20.2¡À3,1%) o el dominio TPR aislado (11,3¡À2,7%), siendo la velocidad de importaci¨®n de GR menor (t0,5 = 4¡¯, 8¡¯ y12¡¯ respectivamente). Sin embargo la sobreexpresi¨®n de SGT-1a no afect¨® significativamente tal propiedad. Ensayos de co-inmunoprecipitaci¨®n demostraron que 14-3-3s forma complejos con GR, pero no as¨ª SGT-1a, sugiriendo que 14-3-3s desplaza al complejo FKBP52-dine¨ªna. Tanto 14-3-3s como SGT-1a afectaron la actividad transcripcional de GR y AR, pero con patrones de modulaci¨®n diferentes. Mientras que GR mostr¨® curvas de activaci¨®n bif¨¢sicas con ambas prote¨ªnas TPR (i.e., activaci¨®n seguida de inhibici¨®n a mayor expresi¨®n), AR fue siempre activado independientemente del nivel de expresi¨®n de la prote¨ªna TPR. Estos resultados sugieren que la regulaci¨®n ejercida por SGT-1a y 14-3-3s sobre ambos receptores no ser¨ªa dependiente de Hsp90 y ocurrir¨ªa a nivel nuclear, y que sus elevados niveles de expresi¨®n como los encontrados en c¨¦lulas tumorales prost¨¢ticas favorecer¨ªan el efecto oncog¨¦nico de AR en detrimento del efecto supresor de GR