Regulación de la tirosina quinasa c-src mediante la actividad del canal de cloruro CFTR

MASSIP COPIZ, MARÍA M; VALDIVIESO, ANGEL G; SÁNCHEZ, FRANCISCO; TAMINELLI, GUILLERMO L; PAGANO, ELEONORA S; CLAUZURE, MARIÁNGELES; SHULMAN, GUSTAVO; TEIBER, MARÍA L; SANTA COLOMA, TOMÁS A

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La Fibrosis Quística (FQ) es una enfermedad autosómicarecesiva causada por mutaciones en el canal de cloruro CFTR.Previamente encontramos que la expresión y activación de c-Srcestaba aumentada en células FQ (J Biol Chem 277:17239, 2002).Otros autores observaron que el epitelio FQ muestra una mayorproliferación que el normal y que las células proliferativas tienenuna mayor expresión de receptor de EGF, que activa c-Src. Nuestrahipótesis es que la vía del EGFR podría estar involucrada en laseñalización CFTR ->c-Src. Los objetivos de este trabajo fuerondeterminar si en diferentes modelos celulares se puede corroborarun aumento de la actividad de c-Src y determinar un posible rolde la vía EGFR en el mecanismo de transducción de señalesCFTR ->Src. IncUBAndo células HT29 (CFTR wt), con los inhibidoresdel CFTR glibenclamida, CFTR(inh)-172 y GlyH-101, seobservó que la actividad de c-Src es mayor en las células con elCFTR inhibido. Debido a posibles efectos inespecíficos de estosinhibidores, se corroboraron los resultados transfectando célulasCaCo2, que expresan CFTR wt, con 4 ARNs de interferencia. LosARNi inhibieron la expresión del CFTR en diferente grado. MedianteWB se comprobó que la actividad de c-Src era mayor en laslíneas celulares transfectadas que mostraban mayor inhibición delCFTR. Asimismo, se están estudiando los posibles mecanismosinvolucrados en la señalización CFTR-Src, que incluyen al receptorde EGF (EGFR) y sus ligandos. Se observaron cambios en losniveles de ARN mensajero de EGFR en células CaCo2 (CFTR wt)y CaCo2 tratadas con inhibidores En conclusión, la inhibición dela actividad o expresión del CFTR produce un incremento en laactividad de c-Src y podría estar involucrada la vía del receptorde EGF en la señalización CFTR ->cSrc. Agradecimientos: Subsidiosdel CONICET (PIP 2009-2011), ANPCYT (PICT-2007, 0628)y UCA. Becas CONICET (AGV y MMMC) y ANPCYT (MC).