La Regulación de la expresión del canal de Cl- CFTR por altas dosis de IL-1beta en células CaCo-2 esta mediada por la actividad de JNK

PAGANO, ELEONORA S; VALDIVIESO, ANGEL G; CLAUZURE, MARI¨¢NGELES; MASSIP COPIZ, MAR¨ªA M; S¨¢NCHEZ, FRANCISCO; TAMINELLI, GUILLERMO L; SHULMAN, GUSTAVO; TEIBER, MAR¨ªA L; SANTA COLOMA, TOM¨¢S A

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

El CFTR es el gen involucrado en la fibrosis quística (FQ).Codifica un canal de Cl-. Trabajos previos de este laboratoriodemostraron que el tratamiento de células T84 con interleuquina-1beta (IL-1b 0.50 ng/ml) incrementa la expresión del CFTR mientrasque dosis más altas (2.5 ng/ml) la inhiben. El aumento de la expresiónestá mediado por la activación del factor de transcripciónNF-kB. Dado que la IL-1b resulta elevada en el esputo de pacientesFQ, el objetivo de este trabajo es estudiar el mecanismo en lafase inhibitoria. Se estimularon células CaCo-2 con IL-1b (0, 1 y,2,5 ng/ml) por 4 hs y luego se determinó la expresión relativa delmARN de CFTR, por Real Time PCR. La misma se incrementóen respuesta a 1 ng/ml de IL-1b (1,5 +- 0,03 veces con respectoal control, p< 0.001) y disminuyó 0,6 +- 0,03 veces con respecto alcontrol (p< 0.001, a 2,5 ng/ml de IL-1b). Para determinar si estafase de la curva ocurre vía JUN, se trató las células por 1 horacon el inhibidor específico de la quinasa de JUN, SP600125, adistintas concentraciones (0, 5, 10 y 20 µM) y, luego con IL-1b, abaja y alta dosis. La expresión de CFTR, determinada por RealTime PCR, en presencia del inhibidor SP600125 (5 µM) no sólo nodisminuye a 2,5 ng/ml de IL-1b sino que aumenta casi 4 veces conrespecto al control (p<0.001). Los resultados obtenidos apoyan laparticipación de la vía de JNK en la fase inhibitoria de la acciónde IL-1b sobre la expresión del CFTR. Actualmente se encuentraen estudio la participación de las vías de las quinasas, MAPK yp38, utilizando sus respectivos inhibidores, U0126 y SB203580,así como la expresión de JUN y FOS. Agradecimientos: SubsidiosANPyCT (PICT 00628) y CONICET (PIP 11220080102551). BecasCONICET (AGV, MMC) y UCA (GLT).