Efecto de IL-1b en la regulación de la actividad mitocondrial en Fibrosis Quística

CLAUZURE, MARIÁNGELES; VALDIVIESO, ANGEL G; SÁNCHEZ, FRANCISCO; TAMINELLI, GUILLERMO L; PAGANO, ELEONORA S; MASSIP COPIZ, MARÍA M; SHULMAN, GUSTAVO; TEIBER, MARÍA L. ; SANTA COLOMA, TOMÁS A

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La Fibrosis Quística (FQ) es una enfermedad autosómica recesivaproducida por mutaciones en el gen CFTR (canal transportadorde Cl-). Mediante estudios realizados en nuestro laboratoriosabemos que en FQ existe una falla en la actividad del ComplejoI mitocondrial (mCx-I). A partir de estos resultados y conociendola elevada concentración de interleuquina 1b (IL-1b) en esputode pacientes FQ, nos interesó estudiar un posible rol de estacitoquina en la disminución de la actividad del mCx-I. En primerlugar se estudió la expresión del ARNm de IL-1b. Se emplearondos modelos de FQ: células IB3-1 (mutación DF508 que afectael transporte de Cl-) y S9 (IB3-1 corregidas mediante un vectorviral que expresa CFTR wt) y células CaCo2, que expresan CFTRwt y CaCo2 tratadas con dos inhibidores del transporte de Cl-,CFTR(inh)-172 y GlyH-101. Se observó un aumento en la expresióndel ARNm de la citoquina en las células FQ con respecto alas controles. Por otro lado, se determinó el efecto de IL-1b enla actividad mitocondrial. Se incUBAron células IB3-1 y S9 condistintas concentraciones de IL-1â. Al mismo tiempo, se trataroncon un coctel estimulador de la actividad del CFTR. Luego de 24horas se aislaron mitocondrias y se midió la actividad del mCx-Imediante la técnica de “Blue Native Gels”. En ambos casos, alestimular con IL-1b a bajas dosis, se observó una disminución dela actividad del mCx-I de hasta ~60%. Llamativamente, en IB3-1se observó una recuperación total de la actividad del mCx-I a laconcentración de IL-1b más alta (de 5.0 ng/ml, que es inhibitoriade la expresión del ARNm del CFTR). Podemos concluir queIL-1b modifica la actividad de mCx-I de manera diferente en célulasnormales y en células con la actividad del CFTR afectada.Nuestro objetivo es ahora estudiar el mecanismo involucrado enla regulación de la actividad del mCx-I por IL-1b. Agradecimientos:Subsidios CONICET(PIP 2009-2011), ANPCYT(PICT-2007,0628)y UCA. Becas CONICET (AGV y MMMC) y ANPCYT(MC).