La reducción de la actividad del complejo I mitocondrial en FQ lleva a un aumento en la producción de especies reactivas de oxígeno (ROS)

VALDIVIESO, ANGEL G; SANTA COLOMA, TOMÁS A

Mar del Plata

Congreso; LIV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Mar del Plata; 2009

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La Fibrosis Quística (FQ) es la enfermedad autosómicarecesiva más común, producida por mutaciones en el canal deCl- CFTR. En estudios previos demostramos la regulación negativadel ARN mensajero del gen mitocondrial MTND4 en FQ.Este gen codifica la subunidad MTND4 del Complejo I mitocondrial(CIm), un componente fundamental para su actividad.Mediante la medición de la actividad del CIm por la técnica deBlue Native-PAGE confirmamos que la misma se encontrabasignificativamente reducida en mitocondrias aisladas a partir dedistintos modelos celulares para FQ. Debido a que las fallas enla actividad del CIm pueden conducir a una alteración en la producciónde especies reactivas de oxígeno (ROS) intracelular,decidimos probar si esto también ocurría en FQ. Con este finutilizamos como modelo células Caco-2, provenientes de carcinomade colon, tratadas con inhibidores farmacológicos de laactividad del CFTR (gliben-clamida y CFTR(inh)-172) para imitarla condición FQ. La medición de ROS intracelular fue medidapor espectrofluorometría utilizando la sonda fluorescente DADCFH.La medición de ROS fue realizada a distintos tiempos deinhibición del CFTR para determinar, en caso de que existiesealguna alteración, si esta ocurría antes o después de la disminuciónde la actividad del CIm. En resultados preliminares observamosun aumento significativo en la producción de ROS alas 48 hs, tiempo en el que ocurre una disminución en la actividaddel CIm. Estos resultados sugieren que el aumento en laproducción de ROS podría deberse a la disminución en la actividadCIm en FQ, provocada por la reducción de la expresióndel gen MTND4. La inducción del aumento en ROS en FQ podríaexplicar, al menos en parte, algunos de los síntomas característicosde esta enfermedad. Agradecimientos: subsidiosANPCyT (PICT 2007-00628), CONICET (PIP 11220080102551),UCA y beca posdoctoral del CONICET (AGB).