Regulación de la tirosina quinasa c-src mediante la actividad del canal de cloruro CFTR (II).

MASSIP COPIZ MARÍA MACARENA; VALDIVIESO ANGEL GABRIEL; CLAUZURE, M.; SANTA COLOMA TA

Mar del Plata

Congreso; LVIII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica, Mar del Plata, Noviembre 20-23 de 2013.; 2013

Sociedad Argentina de Medicina Clínica

La Fibrosis Quística (FQ) es una enfermedad hereditaria autosómica recesiva muy frecuente. Es causada por mutaciones en el canal de cloruro CFTR, siendo la más frecuente la deleción de una fenilalanina en la posición 508. Anteriormente encontramos que la expresión y activación de SRC estaba aumentada en células FQ y que LPS (lipopolisacárido bacteriano) tenía un rol diferencial en dicha activación. Los objetivos de este trabajo fueron estudiar las vías de señalización involucradas en la estimulación por LPS y corroborar en otros modelos celulares este aumento de la actividad de SRC. Inicialmente se utilizaron células IB3-1 (con la mutación deltaF508) y S9 (IB3-1 corregidas que expresan CFTR wt) a las cuales se las trató con LPS e inhibidores de las vías de p38 MAPK, NF-kB, MEK 1/2 y JNK 1/2/3. Mediante Western Blots se observó un aumento diferencial de SRC en las células IB3-1 (FQ) comparadas con las S9, luego del tratamiento con LPS, y una disminución de este aumento al ser tratadas con los 4 inhibidores. Posteriormente, se utilizó otro modelo celular para poder corroborar estos resultados: se transfectaron células CaCo2, que expresan CFTR wt, con ARNs de interferencia, los cuales inhibieron la expresión del CFTR en diferente grado. Mediante WB se observó que la actividad de SRC era mayor en las líneas celulares transfectadas que mostraban mayor inhibición del CFTR. A su vez, las células control mostraban un aumento de la actividad de SRC al ser tratadas con el inhibidor de la actividad del CFTR (Inh-172). Paralelamente se está estudiando el posible rol diferencial de la IL-1β en la regulación de SRC. En conclusión, la inhibición de la actividad o expresión del CFTR produce un incremento en la actividad de SRC y las células FQ poseen mayor sensibilidad que las células normales frente a la estimulación por LPS. Agradecimientos: Subsidios ANPCYT (PICT-2007-00628, PICT-2012-1278), CONICET (PIP 2009-2011, PIP 2012