Efectos de IL-1beta sobreen la actividad mitocondrial en Fibrosis Quística

CLAUZURE, MARIÁNGELES; VALDIVIESO ANGEL GABRIEL; MASSIP COPIZ MARÍA MACARENA; SCHULMAN GUSTAVO; SANTA COLOMA TOMÁS A.

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La fibrosis quística (FQ) es una enfermedad autosómica recesiva producida por mutaciones en el gen CFTR (canal transportador de Cl-). En trabajos previos estudiamos la posible regulación por CFTR de la expresión de interleuquina 1beta (IL-1beta) en dos líneas celulares: IB3-1 (mutación ∆F508 que afecta el transporte de Cl-) y S9 (IB3-1 corregidas mediante un vector viral que expresa CFTR wt). Por Real Time RT-PCR demostramos un aumento en la expresión del ARNm de la citoquina en las células FQ con respecto a las controles. En este trabajo se procedió a confirmar estos resultados analizando los niveles de secreción de IL-1beta mediante un inmunoensayo de DotBlot. Los resultados obtenidos muestran una diferencia significativa de expresión de IL-1beta en IB3-1 comparada con las células controles. Por otro lado, estudios previos de nuestro laboratorio confirman que existe una falla mitocondrial en FQ localizada en el Complejo I (mCx-I). A partir de estos resultados y conociendo los altos niveles de expresión de IL-1beta en FQ, nos interesó estudiar un posible rol de esta citoquina en la disminución de la actividad del mCx-I. El efecto de IL-1beta en la actividad mitocondrial se determinó en estas mismas líneas celulares. Se incubaron las células con IL-1beta, se aislaron mitocondrias y se midió la actividad del mCx-I mediante la determinación de la actividad de NADH-citocromo c reductasa y por la técnica Blue Native Gels. Al estimular con IL-1beta, se observó una disminución de la actividad del mCx-I en las células controles, mientras que en las células FQ la actividad basal, que es más baja que en los controles, no se vio afectada. Podemos concluir que la IL-1beta se encuentra aumentada en FQ y que modifica la actividad mitocondrial de manera diferente en células normales y en células con la actividad del CFTR afectada. Agradecimientos: Subsidios CONICET (PIP 2009-2011), ANPCYT(PICT-2007,0628) y UCA. Becas CONICET (MC, GS, MMMC)y UCA (AGV).