Disminución de la actividad del complejo I mitocondrial en modelos celulares de Fibrosis Quística

VALDIVIESO ANGEL GABRIEL; CLAUZURE, MARIÁNGELES; MASSIP COPIZ MARÍA MACARENA; SCHULMAN GUSTAVO; SANTA COLOMA TOMAS A.

Mar del Plata

Congreso; LVII Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2012

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La fibrosis quística (FQ) es la enfermedad autosómica recesiva más frecuente en la población de origen europeo. La misma es provocada por mutaciones en el gen CFTR, que codifica un canal de cloruro regulado por AMP cíclico. Mediante estudios de expresión diferencial de genes hemos observado la expresión reducida del gen mitocondrial MTND4 en modelos celulares de FQ. Este gen mitocondrial codifica una subunidad del complejo I mitocondrial (CIm), que ha sido reportada como esencial para el ensamblaje y la actividad de dicho complejo. El CIm es el punto de entrada de electrones al sistema de fosforilación oxidativa y la falla en su actividad puede conducir a la producción de especies reactivas de oxígeno, con consecuencias muy dañinas para la correcta función celular. El objetivo de este trabajo es demostrar que la actividad del CIm también se ve afectada en FQ. Mediante el uso de Blue Native-PAGE, se encontró reducida la actividad en gel (AEG) del CIm en células CFDE e IB3-1 (líneas celulares FQ)comparadas con las células CFDE/6RepCFTR y S9 (corregidas para expresar CFTR salvaje), respectivamente. Además, las líneas celulares T84 y Caco-2 de carcinoma de colon humano, las cuales poseen una alta expresión de CFTR, ya sea tratadas con inhibidores del CFTR (glibenclamida, CFTR (inh)-172 y GlyH101) o transfectadas con shRNAi (?short hairpin-RNA interference?) específico contra CFTR, mostraron una reducción significativa en la AEG del CIm. La reducción de la actividad del CIm causada por la inhibición de CFTR, tanto en condiciones fisiológicas como patológicas, podría tener un profundo impacto en las funciones mitocondriales y la fisiología celular de la FQ. Agradecimientos: Subsidios del CONICET (PIP 2009-2011), ANPCYT (PICT-2007, 0628) y UCA. Becas CONICET (MMMC y GS), ANPCYT (MC),y UCA (AGV).