La inhibición de la actividad o expresión del canal CFTR disminuye el potencial de membrana mitocondrial e induce apoptosis

TEIBER, MARÍA L; VALDIVIESO, ANGEL G; MASSIP COPIZ, MARÍA M; CLAUZURE, MARIÁNGELES; SÁNCHEZ, FRANCISCO; SHULMAN, GUSTAVO; TAMINELLI, GUILLERMO L; PAGANO, ELEONORA S; SANTA COLOMA, TOMÁS A

Mar del Plata

Congreso; LV Reunión Científica Anual de la Sociedad Argentina de Investigación Clínica; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

La apoptosis, o muerte celular programada, es un mecanismo fisiológico del organismo para eliminar células no deseadas y es fundamental en el mantenimiento de la homeostasis de los tejidos en renovación continua. El rol de la apoptosis en la patogénesis de la Fibrosis Quística (enfermedad autosómica recesiva causada por mutaciones en el gen CFTR) es aún un tema controvertido, con resultados en ambos sentidos. El objetivo de este trabajo fue determinar si la actividad del CFTR afecta el potencial de membrana mitocondrial (un marcador temprano de apoptosis) e induce apoptosis o necrosis celular. Con este fin se midió el potencial de membrana mitocondrial por citometría de flujo, utilizando TMRE como marcador del potencial de membrana mitocondrial y anexina-V e ioduro de propidio como marcadores de apoptosis y necrosis, respectivamente. Se utilizaron como modelo celular células HT29 tratadas o no con el inhibidor del CFTR (CFTR Inh172) y células Caco-2 que expresan en forma estable cuatro ARNs de interferencia (y su control). Este último modelo nos permite descartar posibles efectos inespecíficos del inhibidor del CFTR, ya que el CFTR no se encuentra inhibido sino que su expresión y actividad se encuentran disminuidas. En ambos modelos (HT29 y Caco-2), en las células que poseían el CFTR afectado (inhibido o disminuido), se observó una disminución del potencial de membrana mitocondrial y un aumento moderado de la apoptosis, medida como la capacidad de unir anexina-V. Los resultados sugieren que en FQ efectivamente existe un incremento en la proporción de células con apoptosis. Queda por aclarar si la apoptosis surge como consecuencia de la disminución de la actividad del Complejo I mitocondrial que hemos observado en células que poseen afectada la con actividad o expresión del CFTR y el mecanismo involucrado. Agradecimientos: Subsidios del CONICET (PIP 2009-2011), ANPCYT (PICT-2007, 0628) y UCA. Becas CONICET (AGV y MMMC), ANPCYT (MC) y UCA (MLT y GLT).