Efecto de Cr(VI) y fenol sobre la membrana citoplasmática de Acinetobacter guillouiae SFC 500-1A: cambios en el estado físico y modulación de las actividades lípido quinasas y fosfolipasas

FERNANDEZ M; PAULUCCI N.S; PEPPINO MARGUTTI ; BIASUTTI A.M.; RACAGNI, G; VILLASUSSO AL; AGOSTINI E; GONZÁLEZ, P. S.

San Luis

Congreso; VII Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC ARG, Capítulo Argentina). Octubre 2018, Ciudad de San Luis; 2018

Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC ARG)

A. guillouiae SFC500-1A se aisló de sedimentos de una curtiembre contaminados con cromo y fenol y fue capaz de remover simultáneamente dichos contaminantes con elevada eficiencia. El fenol fue metabolizado vía catecol 1,2-dioxigenasa y el Cr(VI) reducido mediante cromato reductasas. En este trabajo se analizó el efecto de Cr(VI) (25 mg/L) y/o fenol (300 mg/L), sobre la membrana citoplasmática de A. guillouiae SFC500-1A, evaluando los cambios en el estado físico, en la composición de fosfolípidos (PLs) y ácidos grasos (FAs) así como las variaciones en la actividad de enzimas involucradas en señalización celular (lípido quinasas y fosfolipasas). Para ésto, se realizaron ensayos de polarización de fluorescencia, extracción y separación de PLs mayoritarios marcados con [1- 14C] y minoritarios marcados con [γ32P], análisis de FAs mediante GC-MS, y medición de las actividades fosfolipasa D y A2 (PLD y PLA2) utilizando sustratos fluorescentes. Se observó que los tratamientos con Cr(VI) y Cr(VI)+fenol generaron cambios en los parámetros analizados, pero el fenol por sí sólo no produjo alteraciones sobre la membrana, probablemente porque se metaboliza completamente. Los cambios frente a Cr(VI) y a Cr(VI)+fenol implicaron un aumento rápido de la rigidez de la membrana citoplasmática, que se intensificó después de 16 h por un incremento en cardiolipina (CL), una disminución en fosfatidiletanolamina (PE), así como una disminución en la relación de los FAs insaturados/saturados. La disminución de PE podría deberse en parte a la actividad de PLA2, que aumentó significativamente en estas dos condiciones. Además, el Cr(VI) y ambos contaminantes en simultáneo, modificaron los niveles de los PLs minoritarios, tales como fosfoinosítidos (PIPs) y ácido fosfatídico (PA). Se sugiere que el PA, producto de la ruta de los fosfoinosítidos (PLC/DGK), desempeñaría funciones claves en la activación de diferentes componentes de vías de señalización, algunos de los cuales podrían activar a genes que codifican para cromato reductasas u otras enzimas, responsables de la atenuación del estrés o daño causado por la exposición al metal. No se logró determinar la actividad PLD, sin embargo, se detectó el determinante genético que codificaría para esta enzima. Estos resultados contribuyen a la comprensión de los procesos que ocurren a nivel de membrana cuando A. guillouiae SFC500-1A se expone a Cr(VI) y fenol, que constituirían respuestas adaptativas frente a condiciones ambientales adversas.