Remoción de 2,4-diclorofenol mediante peroxidasas de raíces transformadas de tabaco.

ANGELINI VA; GONZALEZ P; AGOSTINI E.

Mar del Plata

Congreso; II Congreso Argentino de la Sociedad de Toxicología y Química Ambiental (SETAC); 2008

Algunas enzimas son potencialmente aplicables a la biorremediación de compuestos tóxicos que contaminan el medio ambiente, como el 2,4-diclorofenol (2,4-DCF). Entre ellas, las peroxidasas (Px) son oxidorreductasas que pueden catalizar la oxidación de compuestos fenólicos utilizando H2O2. En este trabajo se extrajeron diferentes fracciones de Px, a partir de cultivos de raíces transformadas de tabaco salvajes (wt) de un clon DT, transgénico para dos  Px básicas de tomate (TPX1 y TPX2) y se analizaron las condiciones óptimas de remoción de 2,4-DCF. Utilizando tampón Acetato/Acético 50 mM pH 5 de diferente fuerza iónica, se obtuvo extracto crudo total (ECT), Px solubles (PS) y Px iónicamente unidas a pared celular (PIU). La reacción de remoción del contaminante se realizó a pH neutro, con concentraciones de 2,4-DCF que variaron entre 10 y 100 mg/l y concentraciones de H2O2 de 0,2 a 1 mM, a temperatura ambiente. La actividad enzimática se determinó utilizando o-dianisidina y la concentración de 2,4-DCF residual mediante una técnica colorimétrica. La concentración óptima de Px fue de 200 U/ml para todas las fracciones enzimáticas. La eficiencia de remoción de 10 mg/l de 2,4-DCF usando 0,2 mM de H2O2 y 200 U/ml de Px para los diferentes extractos (ECT, PS y PIU de wt y DT) fue de 90% sin presentar diferencia estadísticamente significativa entre los mismos, por lo que se seleccionó a los ECT de wt y DT como extractos de mayor aplicabilidad potencial, debido a su menor costo de obtención. Se evaluó la eficiencia de remoción de los ECT con 25 mg/l de 2,4-DCF. La eficiencia de remoción fue de 65% para la fracción ECT wt y 80 % para ECT DT. Ambos porcentajes se elevaron al usar 0,5 o 1 mM de H2O2  llegando a 80 % en ECT wt y 86 % para ECT DT. Las soluciones post-remocion fueron evaluadas mediante el test de Lactuca sativa, sin mostrar efectos fitotóxicos. Al utilizar concentraciones mayores de 2,4-DCF la eficiencia de remoción disminuyó, siendo del 50 % y 30 % para soluciones conteniendo de 50 y 100 mg/l del contaminante respectivamente, sin mostrar diferencias entre los ECT de wt y DT. Los resultados sugieren que las Px obtenidas de raíces transformadas de tabaco podrían ser aplicadas para la remoción de 2,4-DCF en concentraciones menores a 50 mg/l en aguas contaminadas, optimizando en cada caso las condiciones de reacción.