Localización in situ de Asa y permeabilización en raíces transformadas de tomate

WEVAR OLLER AL; AGOSTINI E.; MILRAD S.; MEDINA MI.

Huerta Grande, Cba

Congreso; XVII Jornadas de la SOC. de BIOLOGIA de CORDOBA; 2009

SOCIEDAD DE BIOLOGIA DE CORDOBA

Estudios previos de adición de precursores, realizados en nuestro laboratorio, indicaron que las raíces transformadas de tomate, totalmente aisladas, son capaces de sintetizar per se vitamina C ó ácido ascórbico (AsA). Con el objetivo de determinar la localización in situ de dicha vitamina, en el presente trabajo, se estudió su ubicación mediante la técnica de tinción con nitrato de plata. Además, se intentó la permeabilización de los cultivos aplicando pectinasas. Se utilizó un clon de RT salvaje (WT4) y el clon transgénico UR4, el cual sobreexpresa el gen GalUR que codifica la enzima galacturonato reductasa involucrada en una vía alternativa de síntesis de AsA. La vitamina C se ubicó en ambos tipos de cultivo (WT4 y UR4) preferencialmente asociada al floema del tejido radicular. Este resultado, si bien es novedoso en raíces, concuerda con los antecedentes descritos en hoja y tallo vegetal. Además, refuerzan el rol del floema en el transporte a larga distancia de AsA, aún en raíces completamente aisladas de la planta. La aplicación de pectinasas produjo un leve incremento en la acumulación de AsA en las raíces pero no se detectó en el medio de cultivo. Probablemente se liberen conjuntamente enzimas capaces de degradar este metabolito. Estudios previos de adición de precursores, realizados en nuestro laboratorio, indicaron que las raíces transformadas de tomate, totalmente aisladas, son capaces de sintetizar per se vitamina C ó ácido ascórbico (AsA). Con el objetivo de determinar la localización in situ de dicha vitamina, en el presente trabajo, se estudió su ubicación mediante la técnica de tinción con nitrato de plata. Además, se intentó la permeabilización de los cultivos aplicando pectinasas. Se utilizó un clon de RT salvaje (WT4) y el clon transgénico UR4, el cual sobreexpresa el gen GalUR que codifica la enzima galacturonato reductasa involucrada en una vía alternativa de síntesis de AsA. La vitamina C se ubicó en ambos tipos de cultivo (WT4 y UR4) preferencialmente asociada al floema del tejido radicular. Este resultado, si bien es novedoso en raíces, concuerda con los antecedentes descritos en hoja y tallo vegetal. Además, refuerzan el rol del floema en el transporte a larga distancia de AsA, aún en raíces completamente aisladas de la planta. La aplicación de pectinasas produjo un leve incremento en la acumulación de AsA en las raíces pero no se detectó en el medio de cultivo. Probablemente se liberen conjuntamente enzimas capaces de degradar este metabolito. Apoyo PICTO-UNRC, PPI-UNRC y CONICET.