Obtención de cultivos de raíces transformadas transgénicas mediante transformación sucesiva

TALANO M, SOSA ALDERETE L; WEVAR OLLER AL, ERIC I, AGOSTINI E, MEDINA MI

Villa Giardino, Córdoba

Congreso; XV Jornadas Científicas de la Soc. de Biología de Cordoba; 2005

Sociedad de Biología de Córdoba

OBTENCION DE CULTIVOS DE RAICES TRANSFORMADAS TRANSGENICAS MEDIANTE TRANSFORMACION SUCESIVA Talano M., Sosa Alderete L., Wevar Oller AL., Eric I., Agostini E., Medina MI. Dpto. Biol. Molec. FCEFQyN. Río Cuarto. Cba. mtalano@exa.unrc.edu.ar, Sosa Alderete L., Wevar Oller AL., Eric I., Agostini E., Medina MI. Dpto. Biol. Molec. FCEFQyN. Río Cuarto. Cba. mtalano@exa.unrc.edu.ar Los cultivos de raíces transformadas (RT) han recibido especial atención en las últimas décadas por sus múltiples aplicaciones. Constituyen un sistema vegetal capaz de crecer in vitro en forma ilimitada, estabilidad genética y bioquímica, y crecimiento rápido sin hormonas. La ingeniería genética ha permitido manipular las plantas incorporando genes foráneos para conferir o mejorar una determinada capacidad metabólica. La obtención de RT transgénicas se puede lograr mediante un único paso de transformación utilizando Agrobacterium rhizogenes genéticamente modificado o un inusual procedimiento de dos pasos de transformación empleando A. tumefaciens y A. rhizogenes, denominado transformación sucesiva. El objetivo de este trabajo fue obtener cultivos de RT transgénicas para genes de peroxidasas (tpx1, tpx2 y dobles transgénicas) y para el gen implicado en la síntesis de ác. Ascórbico (GalUR) empleando el sistema de transformación sucesiva, para futuras aplicaciones biotecnológicas. Se obtuvieron clones estables de RT transgénicas de tabaco que expresan los genes foráneos, tpx1, tpx2 y el doble transgénico y RT de tomate que expresan el gen GalUR, empleando explantos de plantas transgénicas que portaban dichos genes por transformación inicial con A. tumefaciens. Se comprobó, por PCR, que los clones obtenidos presentaron el gen rol C, que caracteriza la naturaleza propia de las RT, como así también conservaron el gen foráneo integrado en las plantas utilizadas. Se comparó el índice de crecimiento, las actividades enzimáticas y los zimogramas (IEF) de los clones transgénicos y salvajes. Los datos presentados evidencian la eficiencia del sistema de transformación sucesiva, para obtener clones estables de RT transgénicos, la que constituye una herramienta útil para mejorar o conferir nuevas características a los cultivos con fines biotecnológicos. Financiado por SECYT UNRC y PICTO. Talano M., Sosa Alderete L., Wevar Oller AL., Eric I., Agostini E., Medina MI. Dpto. Biol. Molec. FCEFQyN. Río Cuarto. Cba. mtalano@exa.unrc.edu.ar, Sosa Alderete L., Wevar Oller AL., Eric I., Agostini E., Medina MI. Dpto. Biol. Molec. FCEFQyN. Río Cuarto. Cba. mtalano@exa.unrc.edu.ar Los cultivos de raíces transformadas (RT) han recibido especial atención en las últimas décadas por sus múltiples aplicaciones. Constituyen un sistema vegetal capaz de crecer in vitro en forma ilimitada, estabilidad genética y bioquímica, y crecimiento rápido sin hormonas. La ingeniería genética ha permitido manipular las plantas incorporando genes foráneos para conferir o mejorar una determinada capacidad metabólica. La obtención de RT transgénicas se puede lograr mediante un único paso de transformación utilizando Agrobacterium rhizogenes genéticamente modificado o un inusual procedimiento de dos pasos de transformación empleando A. tumefaciens y A. rhizogenes, denominado transformación sucesiva. El objetivo de este trabajo fue obtener cultivos de RT transgénicas para genes de peroxidasas (tpx1, tpx2 y dobles transgénicas) y para el gen implicado en la síntesis de ác. Ascórbico (GalUR) empleando el sistema de transformación sucesiva, para futuras aplicaciones biotecnológicas. Se obtuvieron clones estables de RT transgénicas de tabaco que expresan los genes foráneos, tpx1, tpx2 y el doble transgénico y RT de tomate que expresan el gen GalUR, empleando explantos de plantas transgénicas que portaban dichos genes por transformación inicial con A. tumefaciens. Se comprobó, por PCR, que los clones obtenidos presentaron el gen rol C, que caracteriza la naturaleza propia de las RT, como así también conservaron el gen foráneo integrado en las plantas utilizadas. Se comparó el índice de crecimiento, las actividades enzimáticas y los zimogramas (IEF) de los clones transgénicos y salvajes. Los datos presentados evidencian la eficiencia del sistema de transformación sucesiva, para obtener clones estables de RT transgénicos, la que constituye una herramienta útil para mejorar o conferir nuevas características a los cultivos con fines biotecnológicos. Financiado por SECYT UNRC y PICTO.