La actividad de las glutatión S-transferasas: ¿es regulada por el reloj circadiano??

SOSA ALDERETE, LG; AGOSTINI E.; SHRODER P

Rosario

Congreso; V CONGRESO GRAFOB 2020 (Grupo Argentino de Fotobiología); 2020

Grupo Argentino de Fotobiología

El reloj circadiano (RC) es capaz de coordinar de manera diaria no sólo los mecanismos de respuesta a las señales externas, sino también anticiparse a las variaciones predecibles del medio ambiente. Esto sugiere que una de sus principales funciones es conferir ventajas adaptativas (Hsu et al. 2014; Bendix et al. 2015). En mamíferos se ha demostrado que los genes codificantes para las enzimas del metabolismo de compuestos xenobióticos (MCX), están regulados por el RC (DeBruyne et al. 2014). En plantas, también se ha descripto un mecanismo de detoxificación de xenobióticos similar al de mamíferos, que involucra tres fases. Sin embargo, existe escasa información respecto a las enzimas asociadas al MCX y su posible regulación por el RC. Recientemente nuestro grupo de trabajo ha descripto que tanto las plántulas como las raíces transformadas (RT) de Nicotiana tabacum, presentaron similares perfiles de expresión de los genes reloj así como de los genes asociados al MCX, pero cuando las RT fueron tratadas con un contaminante como el fenol, los perfiles de expresión de ambos grupos de genes se vieron significativamente afectados (Sosa Alderete et al. 2018). A partir de estas evidencias, en el presente trabajo se propone: I) Analizar si las glutation S transferasas (GSTs) pertenecientes a la fase II del MCX presentarían un perfil de actividad circadiano; II) Evaluar el efecto que desencadenaría el tratamiento con un contaminante emergente como el Paracetamol (P) sobre los perfiles de actividad de estas enzimas en cultivos de RT de tabaco sincronizadas o no por fotoperiodo. Bajo condiciones controles (tratamiento con agua), los perfiles de actividad de las GSTs, empleando como sustratos CDNB, mostraron un comportamiento circadiano con su máximo valor de actividad hacia el final de la fase de luz (ZT16) y mínimos valores durante la fase de luz (ZT4, 10 y 26). Por su parte, el tratamiento de las RT con P (1 mM), afectó la actividad de las GSTs puesto que las RT mostraron un perfil de actividad en anti-fase con respecto al control, donde los mayores valores se registraron al ZT4 y ZT10 y mínimos al ZT16. Bajo oscuridad constante (ausencia de fotoperiodo) y condición control, la actividad GSTs fue mayor al ZT10 (día subjetivo) decayendo hacia el ZT16 y ZT26. El tratamiento con P incrementó, de manera significativa, la actividad GSTs principalmente al ZT16 y 26 y siendo mínima al ZT4. Estos resultados permiten sugerir que la actividad GSTs estaría bajo el control del RC, el cual se ve afectado por el tratamiento con P. Además, en ausencia de fotoperiodo la actividad GSTs también parece conservar un perfil circadiano, con mayor actividad y por más tiempo (ZT16 y 26) bajo tratamiento con P, indicando que en ausencia de luz, la actividad GSTs tendría un rol clave en la fase II del MCX, catalizando la conjugación del P y promoviendo de esta manera la remoción de este contaminante emergente.