El ascorbato extracelular inhibe las peroxidasas apoplástica durante el desarrollo foliar.

PINEDO M; LECHNER, L; CREUS C; SIMONTACCI, M; AGUIRREZÁBAL L.A.N

Mar del Plata

Taller; Taller ASAGIR 2010; 2010

ASAGIR

Las peroxidasas participan de diferentes procesos fisiológicos que incluyen el endurecimiento y ablandamiento de paredes celulares y la detoxificación de especies activas de oxígeno generadas en situaciones de estrés. Ensayos previos mostraron que las peroxidasas solubles del apoplasto, analizadas con Tetrametilbencidina (TMB), se incrementan significativamente después de que las hojas alcanzan su máxima superficie durante el desarrollo foliar de girasol. Sin embargo, en zimogramas semidesnaturalizantes, usando 4-Cloronaftol como sustrato, los fluidos extracelulares (IWF) obtenidos por infiltración y centrifugación de las hojas mostraron la existencia de isoformas de la enzima en hojas en activo crecimiento sugiriendo la existencia de un mecanismo regulatorio en esa misma fracción. La presencia de un inhibidor apoplástico en órganos jóvenes se confirmo incubando volúmenes diferentes de esos fluidos con IWF de hojas desarrolladas. Los ensayos de caracterización mostraron que se trataba de una molécula de naturaleza no proteica de tamaño menor a 3 kDa. El rol del ascorbato como inhibidor de peroxidasas apoplásticas se verifico con ascorbato comercial y posteriormente con la destrucción de la actividad inhibitoria del IWF por incubaciones con ascorbato oxidasa. La relevancia fisiológica de la inhibición fue inferida a partir de la cuantificación de ascorbato en IWF. El contenido de inhibidor y de ascorbato disminuyó en forma inversa a la actividad de peroxidasas durante el desarrollo de la hoja. Este reporte constituye una evidencia del rol del ascorbato extracelular como regulador endógeno de la actividad de peroxidasas apoplásticas durante el crecimiento foliar.