Regeneración de plantas de Lotus glaber por cultivo in vitro de lámina foliar.

ESPASANDÍN, F.; PEDRO ALFONSO SANSBERRO; LUNA, C. V.; MROGINSKI, L. A.

Corrientes

Congreso; 17ma Reunión de Comunicaciones Científicas y Técnicas; 2005

Fac. Cs. Agrarias (UNNE)

Con el objeto de desarrollar un sistema que posibilite la clonación de Lotus glaber Mill. se cultivaron trozos de lámina foliar (4 a 5 mm de longitud) extraídos de brotes jóvenes provenientes de plántulas obtenidas por germinación in vitro de sus semillas. Las semillas fueron previamente desinfectadas y cultivadas en un medio químicamente definido, compuesto por las sales y vitaminas de Murashige y Skoog (1962), semisólido (agar 0.65 %) y adicionado con 30 gr·L-1 de sacarosa. Al cabo de 15 días de cultivo, se extrajeron porciones de hojas que fueron subcultivadas en un medio basal de igual composición, adicionado con diferentes concentraciones y combinaciones de ácido indolacético (AIA), ácido naftalenacético, (ANA) y benciladenina (BA), cinetina (CIN) y thidiazuron (TDZ). Los cultivos fueron incubados a 27 ± 2 °C y 14 h de fotoperíodo (116 mmol·m-2·seg-1). Transcurridos 45 días del subcultivo, prácticamente en todos los medios ensayados se formaron vástagos, lográndose los mejores resultados cuando se cultivaron trozos de lámina foliar en medios de cultivo suplementados con ANA y BAP, en donde 40.1±18.3% de los explantes cultivados brindaron 19.7±3.3 brotes adventicios. Posteriormente éstos  fueron subcultivados en un medio sin reguladores del crecimiento vegetal, regenerándose plantas completas al cabo de 75 días desde la inducción. Más del 70% de las plantas obtenidas superaron la etapa de rustificación manifestando un fenotipo normal.