Interacción de antidiabéticos con Albúmina del Suero Humano

CECILIA CHALLIER; SUSANA CRIADO; M. ALICIA BIASUTTI

Cordoba

Congreso; XVII Congreso Argentino de Fisicoquimica y Quimica Inorganica; 2011

Asociacion Argentina de Fisicoquimica

Introducción:Gliclazida (Gli) y Glipizida (Glip) son antidiabéticos que corresponden al grupo de las sulfonilureas, los cuales son indicados en el tratamiento de la diabetes mellitus tipo 2 y actúan aumentando la liberación de insulina de las células Beta del páncreas1, 2. Por su parte, la albúmina del suero humano (HSA) es uno de los principales transportadores de drogas en el plasma sanguíneo. La misma posee tres dominios (I,II, y III), cada uno de los que se encuentra dividido en dos subdominios (A y B). Los sitios de interacción característicos de HSA son el sitio I, ubicado en el subdominio IIA y el sitio II ubicado en el subdominio IIIaA 3. Se ha demostrado que algunos antidiabéticos pueden producir reacciones con efecto fototóxico a través de la producción de especies reactivas de oxígenoiv. Por tal motivo resulta de interés investigar las posibles interaciones entre la proteína transportadora y los sustratos en cuestión, como asimismo la influencia que HSA puede producir sobre el proceso fotodegradativo de los antidiabéticos. Objetivos: Estudiar la interacción de los antidiabéticos con HSA y determinar las constantes de unión “binding” para dicha interacción. Investigar el proceso fotodegradativo mediado por especies reactivas de Oxigeno (ROS) de Gli, Glip y HSA por separado y posteriormente el de los antidiabéticos en presencia de la albúmina. Resultados: Las determinaciones de las constantes de binding (Kb) se realizaron a través de medidas de quenching de fluorescencia siguiendo la emisión del fluoroforo intrínseco de HSA (único triptófano ubicado en el sitio I de la proteína). Los resultados fueron analizados mediante el tratamiento de Stern-Volmer modificado y las constantes Kb fueron obtenidas mediante el tratamiento de Scatchard. Por otro lado, se realizaron medidas de desplazamiento a sitio de HSA, utilizando como moléculas pruebas: Dansilamida (DA), conocida por su asociación al sitio I y Dansilprolina (DP) la cual se une al sitio IIii. Se estudio la fotodegradación sensibilizada por Perinaftenona (PN) de los antidiabéticos libres y posteriormente asociados a HSA. El proceso fotodegradativo ocurre principalmente a través de O2(1Δg). Conclusiones:Los valores de Kb para Gli varían con la temperatura, en el rango comprendido entre 11 y 35 ºC, mientras que el efecto no es muy notorio para Glip, en el mismo rango estudiado. Para el primer caso, dicha variación permitió la determinación de los parámetros termodinámicos de la interaccion Gli-HSA. Los resultados indican que Gli se une a ambos sitios de la proteína mientras que Glip solo se une al sitio I de HSA. Las velocidades de consumo de oxigeno de los antidiabéticos varían en presencia de la proteína, lo cual indica la influencia de la misma sobre el proceso fotodegradativo. Referencias 1. Sawada F, Inoguchi T, Tsubouchi H. ,Sasaki S., Fujii M., Maeda Y., Morinaga H. Nomura M., Kobayashi K. Takayanagi R. (2008) Metabolilsm Clinical and Experimental 57, 1038-1045. 2. Remko M. (2009) J. Molecular structure: THEOCHEM 897, 73-82. 3. Kragh-Hansen, U., Chuang, V.T.G., Otagiri, M., (2002) Practical aspects of the ligand-binding and enzymatic properties of human serum albumin. Biol. Pharm.Bull. 25,695-704.