Proteínas de la familia “High Mobility Group” en Trypanosoma cruzi

CRIBB PAMELA; TROCHINE ANDREA; SERRA ESTEBAN

Chascomús, Buenos Aires, Argentina

Congreso; XXII Reunión Anual de la Sociedad Argentina de Protozoología; 2007

Sociedad Argentina de Protozoología

Proteínas de la familia “High Mobility Group” en Trypanosoma cruzi PAMELA CRIBB, ANDREA TROCHINE Y ESTEBAN SERRA. cribb@ibr.gov.ar Instituto de Biología Molecular y Celular de Rosario. Fac. Cs. Bioq. y Farm. UNRosario. Las proteínas de la familia “High Mobility Group” (HMG) son componentes abundantes de la cromatina que participan en la ejecución y regulación de las funciones nucleares. Presentan funciones genómicas globales en el establecimiento de dominios de cromatina activa e inactiva y funciones de control específico sobre un número limitado de genes. Existen tres familias de proteínas HMG: A, B y N, con diferentes formas de unión y actividades. Mediante minería de datos, se encontraron dos alelos para una proteína del tipo HMGB (TcHMGB-1) en el genoma de T. cruzi. TcHMGB-1 tiene dos dominios “HMG box” al igual que las HMGBs de mamíferos. Se diseñaron oligonucleótidos específicos que permitieron amplificar la región codificante para TcHMGB-1, la cual fue clonada en vectores de expresión en E. coli. La proteína recombinante se expresó y purificó como fusión a GST y la misma se utilizó para obtener anticuerpos específicos en conejo. Ensayos de “Western Blot” nos permitieron verificar la expresión de la proteína en epimastigotes, tripomastigotes y amastigotes de T. cruzi. Tal como era de esperar, se observó la localización nuclear de TcHMGB-1 en epimastigotes mediante inmunofluorescencia. No se han encontrado posibles miembros de las familias HMGN ni HMGA en el genoma de T. cruzi, aunque es llamativa la presencia de 2 proteínas hipotéticas de gran tamaño con varios “AT hooks”, el dominio característico de las HMGAs.