Determinacion electroquimica de adenosina mediante el sistema AuNPs/Split-Aptamero/OsPA

HELENA CERETTI; LUCY LINDERS CORIA ORIUNDO; FERNANDO BATTAGLINI; YOANN ROUPIOZ

Santa Rosa

Congreso; 10° Congreso Argentino de Quimica Analitica; 2019

Asociacion Argentina de Quimica Analitica

El uso de los biosensores mediante la inserción de split-aptámeros (sAPT) a nanopartículas de oro (AuNPs) ha permitido amplificar la señal de reconocimiento de moléculas pequeñas como adenosina usando resonancia de plasmón superficial obteniéndose límites de detección de 50 nM sin embargo, el uso de esta técnica requiere un equipamiento costoso para poder realizar la cuantificación del analito. El OsPA es un polielectrolito redox obtenido a partir de la unión entre un complejo de Os y polialilamina, este complejo al poseer grupos aminos puede interaccionar con las AuNPs modificadas, de tal forma que es posible usar la cupla Os(II)/Os(III) como marcador electroquímico. Para el presente trabajo se deposita oro sobre un electrodo de grafito, el cual luego es modificado con el aptámero complementario cutAPT y PEG-SH, por otro lado, las AuNPs son modificadas primero con el aptámero con 4 bases de reconocimiento APT-ADE4 y con OsPA (Fig. 1a). Los sAPT del electrodo y de las AuNPs en presencia de adenosina hibridizan y mediante voltamperometría de onda cuadrada (SWV) se obtiene una corriente de pico que es proporcional a la concentración del analito (Fig. 1b). El procedimiento fue comparado usando guanosina para determinar la selectividad del sistema. El uso del PEG-SH permite disminuir la respuesta inespecífica hasta un valor menor al 10% así como estabilizar las AuNPs modificadas de tal forma que es posible mantenerlas en presencia de NaCl que favorece el proceso de hibridización. La determinación por SWV de adenosina fue realizada en electrodos independientes a distintas concentraciones, se observa un rango lineal a bajas concentraciones y luego un plateau a valores mayores a 10 nM. En presencia de guanosina, que tiene una estructura muy similar a la adenosina, el sistema responde de igual forma que la respuesta inespecífica, lo cual comprueba la especificidad frente al analito. Esta metodología permite cuantificar cantidades de adenosina del orden nanomolar, con alta selectividad, fácil preparación, bajos límites de detección y un equipamiento más sencillo.