Biosensores para la detección de derivados fenólicos basados en actividad lacasa.

BORON, IGNACIO; WIRTH, SONIA; BATTAGLINI, FERNANDO

La Plata

Congreso; VIII Congreso Argentino de Química Analítica; 2015

Asociación Argentina de Químicos Analíticos

p { margin-bottom: 0.25cm; direction: ltr; line-height: 120%; text-align: left; orphans: 2; widows: 2; }p.western { font-size: 11pt; }p.cjk { font-size: 11pt; }p.ctl { font-size: 11pt; }a:link { color: rgb(0, 0, 255); }Elfenol y sus derivados representan un conjunto de compuestos de granrelevancia en nuestras vidas que van desde señales químicas ennuestro sistema neuroendocrino a residuos de la actividad agrícola eindustrial. Si bien existen métodos cromatográficos sensibles parala determinación de estos compuestos, la electroquímica ofreceoportunidades enel desarrollo de metodologías in situ de bajo costo para su uso enmuestras acuosas naturales.Laslacasas son un grupo de enzimas del tipo oxidorreductasa, capaces deoxidar compuestos fenólicos de diferente naturaleza. Una de susvariantes más comunes proviene del hongo TrametesTrogii,que a su vez posee cuatro isoformas para la misma enzima. Lacaracterización bioquímica previa de las mismas arrojó diferenciasen su termoestabilidad, afinidad por diferentes sustratos,temperatura y pH óptimos.Nuestrogrupo viene realizando una serie de trabajos con el sistemapolietilenimina-dodecilsulfatopara la construcción de electrodos modificados, donde el complejopolielectrolito-surfactante sirve como andamiaje para sostenercatalizadores y/o centros redox utilizados como mediadores.Eneste trabajo se combina el complejo polielectrolito-surfactante conlas isoformas 1 y 3 de la lacasa del hongo TrametesTrogii.Esta última es la encargada de oxidar el derivado fenolico víacatálisis enzimática para que luego el derivado quinónico seareducido electroquimicamente obteniéndose un efecto amplificadordado por la regeneración del reactivo.Lossistemas construidos se caracterizaron por técnicas bioquímicas yelectroquímicas. Finalmente se estudió la sensibilidad en ladetección de catecol y dopamina a pH 4.5 y 7. Los resultados indicanque a pesar de que ambas isoenzimas poseen un pH óptimomoderadamente acido el sistema permitió detectar ambos derivadosfenólicos en el orden de los μmol/L a pH fisiológico. La lacasacorrespondiente a la isoforma 1 mostró mayor sensibilidad y menorlímite de detección.