Optimización de la Terapia Fotodinámica del cáncer mediante el desarrollo de nuevos derivados del ácido 5-aminolevúlico.

GUSTAVO H. CALVO; GABRIEL F. GOLA; ALCIRA BATTLE; ADRIANA G. CASAS; DANIEL A. SÁENZ; GABRIELA DI VENOSA; JAVIER A. RAMIREZ; GABRIEL ORLANDO

Ciudad de Buenos Aires

Congreso; 16° Congreso Internacional de Medicina Interna del Hospital de Clínicas de la Universidad de Buenos Aires; 2016

Hospital de Clínicas de la Universidad de Buenos Aires

Objetivo: La Terapia Fotodinámica (TFD) es un tratamiento antitumoral que se basa en la muerte celular luego de la aplicación de luz sobre células tumorales fotosensibilizadas. El ácido 5-aminolevúlico (ALA) se emplea como precursor de la Protoporfirina IX, que es un potente fotosensibilizador. Las características hidrofílicas de la molécula de ALA limitan la eficacia de la TFD, por lo que se busca modificar estas propiedades, utilizando compuestos derivados de ALA con mayor hidrofobicidad con el objetivo de mejorar la efectividad de la terapia. El objetivo de este trabajo fue desarrollar y testear in vitro nuevos derivados de ALA con el fin de aumentar la eficacia de la TFD.Materiales y métodos: Se sintetizaron 11 derivados de ALA de manera novedosa mediante la reacción de Passerini multicomponente. La efectividad de la TFD se evaluó en la línea tumoral mamaria murina LM2 (Inst. Roffo), en primer lugar mediante la síntesis porfirínica intracelular, realizando una cuantificación fluorométrica (extracción con HCl 5%) y luego mediante la respuesta a la TFD (ensayo de viabilidad celular con MTT). Se calcularon las dosis de luz letales 50 (LD50) como los milijoules/cm2 (mJ/cm2), que producen el 50% de reducción en la viabilidad celular. Los experimentos fueron realizados tres veces por duplicado. Para determinar la significancia estadística entre los valores se utilizó el test de Student.Resultados: La síntesis de porfirinas aumenta con la concentración de ALA, sin embargo la cantidad de porfirinas alcanza un valor máximo debido a la regulación enzimática del ciclo del hemo, el cual se ve aumentado en células tumorales. En primer lugar se testearon los derivados de ALA con el criterio de alcanzar un plateau a una concentración menor a la utilizada con ALA. Del primer screening se descartaron los compuestos menos efectivos que ALA, que eran los más lipofílicos y tenían dificultad en su hidrólisis por esterasas. El estudio se continuó con 5 de los 11 compuestos iniciales, y un posterior análisis permitió descartar 2 de ellos. Los 3 últimos se compararon directamente en la respuesta a la TFD, obteniendo como el más promisorio el llamado ALA-1i, con el cual a 4µM la LD50 fue de 23 ± 2 mJ/cm2, mientras que ALA no indujo muerte celular en las mismas condiciones. Es de destacar que este derivado mostró la misma respuesta que Hexil-ALA, derivado con mejor respuesta a la TFD utilizado actualmente en pacientes oncológicos.Conclusión: De los resultados obtenidos, podemos concluir que los derivados de ALA obtenidos por la reacción multicomponente de Passerini son una opción interesante para la TFD del cáncer, y si bien hemos hallado uno altamente prometedor, es posible asegurar que por medio de la comparación es posible diseñar nuevos compuestos que conduzcan a resultados que optimicen aún más la TFD.