Evaluación de la actividad biológica de Delta 5-2-oxopiperazinas 1,4-disustituídas como inhibidores de la biosíntesis de testosterona y su acción sobre el receptor de andrógenos

BELÉN VECCHIONE; JAVIER EIRAS; GABRIELA PASCIANI; ALEJANDRA ERLEJMAN; ANDREA BRUTTOMESSO

Mar del Plata

Congreso; LV REUNION CIENTIFICA ANUAL; 2010

Sociedad Argentina de Investigación Clínica

Introducción. El cáncer de la próstata (CP) es actualmente la neoplasia maligna más frecuente en los hombres adultos mayores en todo el mundo.1 Aproximadamente el 80% de los tumores de próstata humanos son dependientes de andrógenos. La inhibición de la CYP17 (P450-CYP17, 17alfa-hidroxilasa-C17,20-liasa) es una alternativa prometedora a la combinación de antiandrógeno y análogos de GnRH porque reduce la biosíntesis de andrógenos tanto a nivel testicular como suprarrenal. Esta enzima es clave en la biosíntesis de andrógenos y por lo tanto es un blanco que ha despertado mucho interés. En este trabajo se evaluaron una serie de Δ5-2-oxopiperazina! s 1,4-disustituidas como inhibidores de CYP-17 y su acción sobre el receptor de andrógenos. Resultados. Actividad inhibitoria sobre CYP-17: La enzima Cyp-17 se purificó de ratas Sprague-Dawley según el método de Sergejew and Hartmann.2 Las alícuotas obtenidas fueron almacenadas a -70 ºC. Se determinó la actividad inhibitoria de los nuevos compuestos sintetizados en nuestro laboratorio siguiendo el protocolo detallado por Sergejew and Hartmann. [6]. Se determinó la conversión de progesterona por acción de CYP-17 cuantificando por HPLC, en ausencia y presencia de varias concentraciones de Inhibidores. Se utilizó ketoconazol como inhibidor patrón. Actividad transcripcional de AR: Células HEK 293T se cotransfectaron con el método de fosfato de calcio con distintas cantidades del plásmido pcDNA3-AR, pPSA-LUC (gen de reporte) y pRSV-β-galactosidasa (para normalizar la transfección). Las células se estimularon con dihidrotestosterona (DHT) El cociente de inducción de LUC/β-gal respecto del basal indicó cuál es la concentración de receptor óptima para el ensayo. Luego se ensayaron en paralelo células tratadas solo con DHT y células tratadas con las distintas oxopiperazinas. Conclusiones. En ausencia de una estructura cristalina para la enzima Cyp 17 es necesario sintetizar y evaluar una gran cantidad de compuestos con diferente patrón estructural en la búsqueda de un inhibidor potente y selectivo. Varios de los compuestos han presentado actividad comparable al inhibidor patrón. 1. Murray, T.; et al.. CA Cancer J. Clin. 2007, 57, 43. 2. Sergejew and Hartmann. J. Enzyme Inhibition. 1994, 8, 113.