Efecto del INGAP-PP sobre la expresión de genes involucrados en la remodelación de la matriz extracelular y la angiogénesis determinados por un análisis transcriptómico de islotes de rata

ROMERO, AGUSTÍN; FLORES, LUIS E.; MAIZTEGUI, BÁRBARA; HEIDENREICH, ANA C.; RODRÍGUEZ SEGUÍ, S.A.; ROMÁN, CAROLINA L.; GAGLIARDINO, JUAN J.

Reunión virtual

Congreso; XXII congreso de la Sociedad Argentina de Diabetes (SAD); 2020

Sociedad Argentina de Diabetes

Introducción:El INGAP-PP es un péptido derivado de INGAP que, en animalesnormales y con diabetes, aumenta la masa celular β, la capacidadangiogénica insular y potencia la secreción de insulina estimuladapor glucosa (SIEG) y otros secretagogos. Esto le adjudica unpotencial terapéutico que actuaría específicamente en la patogeniacelular de la diabetes. Conocer su posible efecto sobre loscambios globales en los perfiles de expresióngénica insular, facilitaría la comprensión de su mecanismo deacción. Objetivo:conocer, a través de un estudio transcriptómico, el efecto delINGAP-PP sobre la expresión génica de las células insulares y laposible regulación de distintas vías de señalización implicadas.Materialesy Métodos:Islotes aislados (colagenasa) de rata Wistar normales fueroncultivados 4 días en medio RPMI en ausencia (C) o presencia deINGAP-PP 50 µg/ml (I) y glucosa 11 mM. A su término se utilizaron100 islotes de cada grupo para estudiar la SIEG en presencia deglucosa 3,3 mM ó 16,6 mM (RIA). Delresto de los islotes se extrajo ARN total, una alícuota fue sometidaa secuenciación masiva de ARN (RNA-seq) y otra fue retrotranscriptaa ADNc para utilizarlo como molde en qPCR de marcadores dedesarrollo, regeneración y angiogénesis. Resultados:La presencia de INGAP-PP en el medio de cultivo potenció la SIEGsólo en presencia de glucosa 16,7 mM: C= 5,1±0,2 vs.I=6,6±0,3 ng ins/ug ADN/h (p<0,05). Los islotes I mostraron unaumento significativo de la expresión génica de marcadores dedesarrollo como NKX6.1 (26%) y PDX-1 (42%). Por RNA-seq observamosque INGAP-PP moduló significativamente (p<0,05) la expresión de1303 genes insulares. Estos genes diferencialmente expresados serelacionaron a distintas vías funcionales, tales como remodelaciónde la matriz extracelular y angiogénesis, reforzando nuestrosresultados previos y demostrando el efecto de INGAP-PP sobre laexpresión de VEGF-A (60%), laminina (40%) e integrina (50%). En talsentido, surgieron muchos otros genes relacionados con el desarrolloy la neoformación insular (como la morfogénesis ramificada o eldesarrollo túbulo-epitelial) que abren posibilidades de nuevosestudios. Conclusiones:Estosresultados confirman los previamente descriptos por nuestro gruposobre el efecto de INGAP-PP sobre la regeneración celular βy la angiogénesis, posibilitando la identificación de nuevos genesafectados por este péptido y ampliando su efecto modulador sobre lamasa y función celular βy su posibleuso terapéutico para la prevención y tratamiento de la diabetes. p { margin-bottom: 0.08in; direction: ltr; line-height: 100%; text-align: left; orphans: 2; widows: 2 }p.western { font-family: "Times New Roman", serif; font-size: 12pt; so-language: es-ES }p.cjk { font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt; so-language: es-ES }p.ctl { font-family: "Times New Roman"; font-size: 12pt }