El Compuesto A (CpdA) es un novedoso modulador del receptor de glucocorticoides (GR) capaz de inducir la actividad del factor de transcripción (FT) GATA-3

MARÍA ANTUNICA NOGUEROL, ANA C LIBERMAN, VIVIANE FERRAZ-DE-PAULA, CARLA N CASTRO, KAROLIEN DE BOSSCHER, SARAH GERLO, GUY HAEGEMAN, MARCELO J PERONE, EDUARDO ARZT

Mar del Plata - Argentina

Congreso; LIV Reunion Cientifica Anual, Sociedad Argentina de Investigacion Clinica (SAIC); 2009

Recientemente se ha caracterizado un novedoso modulador del GR, CpdA, capaz de actuar de manera disociada al interferir negativamente con la actividad de FTs (ej. NFkB) que regulan la expresión de genes clave del sistema inmune, sin inducir la expresión de genes que contienen elementos de respuesta a GCs. Previamente hemos demostrado que GCs inhiben la actividad transcripcional de T-bet (Th1) y de GATA-3 (Th2). A diferencia de ello, CpdA inhibe la actividad transcripcional del primero e induce la del segundo. Resulta por lo tanto interesante estudiar el efecto de CpdA sobre GATA-3 y cómo su mecanismo de acción difiere del clásico mediado por GCs.Estudiamos la regulación de GATA-3 por CpdA (10-5 M) mediante transfecciones transientes en la línea celular EL-4 (linfoma T murino) usando los elementos de respuesta de GATA-3 y regiones promotoras de IL-5 (Th2) nativas y mutadas, clonados río arriba del gen reportero de la luciferasa. Además, analizamos la participación de distintas kinasas, utilizando inhibidores específicos de PKA, JNK y p38 MAPK (H89, SP600125, SB203580) (10-50 uM), sobre la actividad de GATA-3. El grado de fosforilación y expresión de GATA-3 y p38 MAPK se analizaron por inmunoprecipitación y Western Blot y la secreción de citoquinas por ELISA.Observamos que CpdA aumenta la actividad transcripional de GATA-3 inducida por AMPc (500 uM) sobre sus elementos de repuesta (150%, p<0.01) y sobre el promotor de IL-5 (314%, p<0.01), al tiempo que estimula la secreción de esta citoquina (197%, p<0.01). Demostramos que CpdA induce fuertemente la fosforilación de p38 MAPK, la cual a su vez induce la actividad transcripcional de GATA-3. Datos preliminares muestran que, mediante esta vía, CpdA induciría la fosforilación de GATA-3 aumentando así su actividad transcripcional. Por lo tanto, CpdA favorecería una respuesta Th2. Estos resultados demuestran el potencial de CpdA como droga anti-inflamatoria.