Diagnóstico de Escherichia coli diarreigénico asociado a diarrea y síndrome urémico hemolítico (SUH) durante el año 2018.

ADRIANA A. ALBANESE; C. CARBONARI; E. MILIWEBSKY

Buenos Aires

Congreso; XV Congreso Argentino de Microbiología ?CAM 2019.; 2019

ASM

Se denomina Escherichia coli diarreigénico (DEC) se caracteriza por su capacidad de causar síndromes diarreicos y es de importancia por la morbi-mortalidad que produce fundamentalmente en países en vías de desarrollo. Se reconocen cinco categorías de E. coli enteropatógeno (EPEC/eae), enterotoxigénico (ETEC/lt/sth/stp), enteroinvasivo (EIEC/IpaH), enteroagregativo (EAEC/aggr) y productor de toxina Shiga (STEC/stx). Una sexta categoría, E. coli de adherencia difusa, es aún discutida. El diagnóstico de DEC no se puede realizar por métodos fenotípicos convencionales, ya que en general presentan características bioquímicas indistinguibles de otras cepas E. coli. Es necesario disponer de técnicas moleculares para la detección de factores de virulencia. El Laboratorio de Referencia utiliza 3 PCRs múltiple (mPCR): mPCR-1 (rfbO157/ stx1/ stx2), mPCR-2 (eae/lt/stp/sth) y mPCR-3 (IpaH/aggr), para el diagnóstico y confirmación de las categorías de DEC. El objetivo de este estudio es presentar los resultados de la detección de DEC utilizando mPCR-1 mPCR-2 y mPCR-3 a partir de muestras de materia fecal (MF) de pacientes con diarrea (D), diarrea con sangre (DS) y SUH derivadas para su diagnóstico en el marco de la vigilancia durante el año 2018. Se analizaron muestras de un total de 213 casos de D (n=52), DS (n=65), SUH (n=92) y sin diagnóstico (SD n=4). Las MF se sembraron en forma directa y después del enriquecimiento en placas de agar MacConkey con sorbitol (SMAC) y luego incubadas a 37ºC por 18 h. Se tomó muestra de la zona de crecimiento confluente de las placas de SMAC; para extracción de ADN y posterior realización de las técnicas de mPCR. Ante una señal positiva por mPCR se procedió al aislamiento de la colonia individual. Para identificar posibles cepas del patotipo emergente EAEC-Stx, las colonias que resultaron ser aggr, fueron ensayadas por PCR para el gen stx. De los 213 casos (200 casos asociados a un patógeno y 13 co-infecciónes) se aislaron 226 cepas de DEC con la siguiente frecuencia: STEC (65%), EAEC (21,2%), EIEC (3,5%), ETEC (3,1%), E. coli O157 no toxigénica (3,1%), EPEC (2,7%) y EAEC-Stx (1,3%). En los casos con un único patógeno de D, DS, SUH y SD se detectaron cepas [STEC (20), EAEC (15), ETEC (5), EPEC (4), E. coli O157 no toxigénico (3) y (EIEC (1)]; [STEC (48), EAEC (9), EIEC (4) y E. coli O157 no toxigénico (1)]; [STEC (68), EAEC (15), EAEC-Stx (2) y ETEC (1)]; [EAEC (2), EPEC (1), y STEC (1)]; respectivamente. En 13 casos se detectaron las co-infecciones de EAEC/STEC (SUH=3; DS=1; D=1); E. coli O157 no toxigénico/STEC (SUH=1; DS=2), EAEC/EIEC (D=2), EAEC-Stx/STEC (SUH=1), EIEC/STEC (SUH=1) y ETEC/EPEC (D=1). Las cepas STEC O157 (84) presentaron los siguientes perfiles de toxina: stx2 (n=83), stx1/stx2 (n=1) y las STEC no-O157 (56) los perfiles stx2 (n=52), stx1 (n=3) y stx1/stx2 (n=1). Se destaca la importancia de la implementación de técnicas moleculares para la detección de DEC, ya que de otra manera muchas infecciones intestinales quedarían sin diagnosticar.