SECRECIONES DÉRMICAS DEL SAPO Rhinella arenarum: ANÁLISIS DE SUS METABOLITOS POR ESI-MS Y UV-MALDI-MS

PETROSELLI, G; POZZI, A G; JUNGBLUT, L D; RAICES, M; ERRA-BALSELLS, R

Mar del Plata

Simposio; XX Simposio Nacional de Química Orgánica; 2015

Sociedad Argentina de Investigación en Química Orgánica

Los sapos sintetizan una serie de compuestos (esteroides, alcaloides, péptidos, entre otros) que acumulan en glándulas dérmicas. Estos compuestos tienen diferentes funciones como protección de patógenos, predadores, etc. La composición de esta secreción depende de la especie, el sexo y la estación del año. Las secreciones de varias especies del género Rhinella han sido estudiadas utilizando diversas técnicas de espectrometría de masa.1,2 En el presente trabajo se describe por primera vez la composición de secreciones del sapo común, Rhinella arenarum, de amplia distribución en América del Sur. Se compara la secreción de macho vs hembra, de ejemplares jóvenes vs adultos y de muestras colectadas en distintas épocas del año.La secreción fue obtenida por presión sobre la glándula parotoidea del sapo. La muestra se disolvió en metanol o en acetonitrilo: agua TFA 0,1% 30:70 (v/v). Se registraron espectros de masa UV-MALDI-TOF (Matrix/Assisted UV Laser Desorption Ionization Time-Of-Flight), utilizando diferentes matrices (ej. ácido sinapínico y norharmano) en modo iónico de detección positivo. Además se registraron espectros de masa utilizando ionización por electrospray, ESI (electrospray ionization) con el analizador orbitrap (ESI-Orbitrap). La asignación de la estructura fue realizada a partir de los pesos moleculares y de la correspondiente fragmentación observada (UV-MALDI-MS/MS; modo LIFT; ESI-Orbitrap MS/MS).En los espectros UV-MALDI de las secreciones estudiadas se detectaron señales en el rango de m/z 150 a 250, en el rango de m/z 650 a 750, en el rango de m/z 1300 a 1500 y a mayores valores de m/z (iones monocargados: pesos moleculares entre 3000 y 6100 Da).En los espectros correspondientes a las secreciones de hembra se observaron más señales respecto a las detectadas en las secreciones de macho. Principalmente, debido a que se observaron aductos sodiados además de iones moleculares protonados. Si bien algunos compuestos fueron detectados en ambos, la intensidad relativa entre ellos es diferente. Por otro lado, no se detectaron diferencias significativas entre las secreciones colectadas en invierno respecto a las del verano.Considerando los espectros MS/MS obtenidos y datos de literatura se proponen estructuras probables de alcaloides y esteroides presentes en estas secreciones.